Дифференциально-диагностические среды. Лакмусовое молоко


Лакмусовое молоко

Lithmus MilkЛакмусовое молоко

M609

 

Эту среду используют для хранения лактобактерий и определения действия бактерий на молоко.

 

 

Рост на среде Litmus Milk (M609), слева направо:1. Escherichia coli2. Pseudomonas aeruginosa3. Clostridium perfringens4. Контроль (незасеянная среда)

 

 

 

Состав**:

Ингредиенты

грамм/литр

Молоко обезжиренное, порошок

100,00

Лакмус

0,50

Натрия сульфит

0,50

Конечное значение рН (при 25°С) 6,8 ± 0,2

 

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Суспензировать 101,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды при постоянном перемешивании. Разлить по 10 мл в пробирки размером 15 х 150 мм. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 5 мин. НЕ ДОПУСКАТЬ ПЕРЕГРЕВАНИЯ СРЕДЫ.

Принцип и оценка результата:

Эта среда наиболее полезна для контроля в молочной промышленности, т.к. она служит достоверным индикатором действия бактерий на молоко (1). Лакмус является хорошим кислотно-щелочным индикатором, который подходит для молочных сред по своему окислительно-восстановительному потенциалу, а также низкой токсичности для микробов, по сравнению, например, с бромкрезоловым пурпурным (2). Для получения полноценного роста некоторых микроорганизмов к основной среде можно добавить глюкозу (до 1% вес/об) и/или дрожжевой экстракт (до 5% вес/об)(1, 2, 3).

Для определения в воде Clostridium perfringens, пробы разного объема засевают в свежепрогретые пробирки с Лакмусовым молоком и вновь прогревают их при 80°С в течение 10-15 мин для уничтожения неспоровых микроорганизмов. Результат учитывают в течение 5 суток инкубирования при 35°С, через каждые 24 часа отмечая положительную реакцию по появлению губчатого сгустка (4, 6). Анаэробные условия в среде можно получить, добавив в нее небольшое количество прогретых железных опилок или 0,1 г восстановленного железа (5). Обезжиренное молоко служит субстратом, который бактерии могут разлагать различными путями. Действие бактерий на молоко в общем можно выразить следующим образом.

Реакция

Причина

Закисление

 

1.Розовый или красный цвет молока

Ферментация лактозы и/или глюкозы в молоке

2.Кислотная коагуляция

Образование молочной кислоты, ведущее к створаживанию казеина и появлению прозрачной водянистой жидкости

3.Губчатый сгусток

Образование газа в сгустке казеина

Щелочение

 

1.Синий цвет молока

Протеолиз с образованием основных аминов или аммиака

2.Щелочная коагуляция с нежным синим сгустком

Превращение казеина в параказеин под действием фермента ренина.

3.Пептонизация

Переваривание казеина, что сопровождается просветлением среды и растворением сгустка

Восстановление

 

Обесцвечивание среды (вид, как у свежеавтоклавированной среды)

Реакция лакмуса в глубине пробирки: под действием микробных редуктаз снижается количество растворенного кислорода и повышается количество бесцветной (восстановленной) формы лакмуса

Получаемые реакции могут быть неспецифичными, поэтому требуется проведение дополнительных тестов.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-лиловый порошок, который может иметь небольшие окрашенные частицы.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет светло-лиловую окраску, непрозрачна, как молоко.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (10,1% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов в течение 14 дней при 35°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)

Рост

Реакция

Lactobacillus acidophilus (13124)

Хороший или обильный

Кислый сгусток (розовый)

Clostridium perfringens (3524)

Хороший или обильный

Губчатый сгусток (газ)

Pseudomonas aeruginosa (27853)

Хороший или обильный

Пептонизация (просветление)

Ссылки:

1. Davis J. G.,1935, J. Dairy Res., 6:121 2. Davis J. G., 1955, A Dictionary of Dairying, 2nd ed, Leonard Hill. 3. Davis J. G., 1959, Milk Testing, 2nd ed., United Trade Press. 4. Department of Health and Social security, 1969, Report No. 21, HMSO, London. 5. Townsend C.T., Somers J. J., Lamb F. C. and Olson N. A., 1956, A Laboratory Manual for the Canning Industry, 2nd ed., National Canners Association, Washington. 6. MacFaddin J. F., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.

 

www.himedialabs.ru

Лакмусовое молоко - Справочник химика 21

    Лакмусовое молоко (для определения редуцирующих свойств). Свежее сырое молоко с низким содержанием микрофлоры оставляют в холодильнике иа 18 ч, сливают сливки и прибавляют 10% раствор лакмуса до голубовато-лилового оттенка. Разливают в пробирки и стерилизуют текучим паром 3 дня по 30 мин. Проверка на стерильность 48 ч при 37°С. [c.239]

    Метод 1. Инокулируют пробирку с лакмусовым молоком (разд. 20.3.20). Реакции культур могут быть следующими. Подкисление появление розовой окраски. Подщелачивание появление синей окраски. Восстановление лакмуса молоко становится белым за счет обесцвечивания лакмуса обычно это происходит в нижней части пробирки. Кислый творожистый осадок твердый розовый сгусток, который растворяется в щелочи и не сжимается. Творожистый осадок сычужного ти- [c.31]

    Вид бактерии Ферментация Образование Действие на лакмусовое молоко [c.185]

    Пробирки с лакмусовым молоком, средой Минкевича (рец. 49) засевают так же, как молоко с метиленовым синим, суточной культурой с плотной или жидкой питательной среды. Посевы инкубируют в термостате в течение 10 дней, ежедневно наблюдая за изменением цвета среды. Редукция лакмуса проявляется полным обесцвечиванием молока, имеющего розовато-сиреневый цвет до посева. В протоколе исследования редукцию лакмуса обозначают буквой Р. [c.65]

    Биохимические свойства выделенных возбудителей оценивают по способности их при посеве и культивировании в анаэробных условиях сбраживать углеводы в средах пестрого ряда Гисса (рец. 44), изменять цвет лакмусового молока (рец. 49), разжижать питательный желатин (рец. 50) и свернутую сыворотку (рец. 52) или яичный белок (рец. 53) (табл. 44). [c.256]

    Лакмусовое молоко (в прописи Минкевича) [c.354]

    В результате роста различных видов бактерий лакмусовое молоко изменяется неодинаково. Изменение среды отмечают в протоколе исследования, пользуясь условными обозначениями  [c.354]

    Лакмусовое молоко, или лакмус-молоко, готовят следующим образом 50 г лакмуса измельчают в ступке и растворяют в 150 мл 40 %-го раствора этилового спирта. Смесь кипятят 1 мин на водяной бане, после отстаивания декантируют (при помощи делительной ворон- [c.133]

    Быстрорастущие клубеньковые бактерии на 10... 14-е сутки подщелачивают лакмусовое молоко, которое при этом слегка синеет или не меняет окраски, и образуют светлое кольцо - сывороточную зону. Только клубеньковые бактерии люцерны, донника и некоторые штаммы клубеньковых бактерий клевера подкисляют лакмусовое молоко (придают ему розовую окраску). [c.134]

    Свертывание лакмусового молока Гидролиз желатина Рост при 37"С [c.36]

    Способность дрожжей, наиболее часто выделяемых из молочных продуктов, сбраживать лактозу, мальтозу и развиваться в лакмусовом молоке в чистой культуре приведена в табл. 23. [c.40]

    Для ускоренной диагностики исследуемый материал центрифугируют и с центрифугатом проводят реакцию нейтрализации (как описано выше). Кроме того, материал засевают на среду Вильсона—Блера и лакмусовое молоко в пробирках и инкубируют при 42 °С. Через 3 — 6 ч при наличии в материале С. perfringens лакмусовое молоко краснеет, образуется губчатый сгусток с пузырьками газа и прозрачная сыворотка (пептонизация), а в среде Вильсона—Блера отмечаются множественные разрывы и почернение. [c.193]

    Бактерия встречается в кишечнике больных личинок пчел в виде палочки длиной 0,5—2 мк. Спор не образует. Растет на обычных бактериологических средах, образуя плотные, с трудом суспендируемые в воде, серые, просвечивающиеся колонии. Растет также на среде, применяемой для культивирования S. pluton. На мясопептонном агаре образует мелкие, гладкие, сероватые колонии, вокруг которых позднее появляется более светлая зона. В бульоне слабый рост наблюдается через 4 дня в виде легкого помутнения и осадка. Желатин не разжижает, лакмусовое молоко не изменяет, образует кислоту из глюкозы, а фруктозу и лактозу не использует. Кровяной агар не гемолизирует. Реакция на катал азу отрицательная или очень слабая. Реакция с метиленовой красной, Воже—Проскауера и индоловый тест — отрицательные. [c.244]

    Тонко измельченные галеты, снятое молоко в порошке, смесь из I части обезвоженной сыворотки крови и 2 частей лакмусового молока, пивные дрожжи, измельченные высушенные гренки или хлебные крошки, выдержанный насгой сена (ежедневно должен быть хорошо проветриваем), Зругодка или измельчен- иые МУХИ. [c.512]

    Для более полной биохимической характеристики культуры выделенного микроба пересевают на среды Гисса с маннитом, мальтозой, сахарозой, сорбитом, адонитом, салицином, дульцитом, в бульон Хоттингера для определения сероводорода, в среду Строгова (рец. 54) или другие среды (рец. 55) для определения индола, в столбик питательного желатина и в пробирку с лакмусовым молоком (см. табл. 34). [c.216]

    Четвертый день. 1. Учитывают характер роста исследуемых культур на средах Гисса, в пробирках с бульоном Хоттингера, пептонной водой, питательным желатином и лакмусовым молоком. [c.219]

    Чистую культуру микроба, выращенную на скошенном мясо-пептонном агаре, пересевают а) на среду Бессоновой с рамнозой (рец. 126) б) на голоднокислый агар по Бессоновой (рец. 125) в) на скошенный мясо-пептонный агар для определения подвижности бактерий, выращенных при 18— 20°С г) в лакмусовое молоко для наблюдения за изменением реакции среды в процессе роста. [c.263]

    Четвертый день. 1. Просматривают посевы, сделанные на среду с рамнозой и лакмусовым молоком. Бактерии чумы в отличие от бактерий псевдотуберкулеза не сбраживают рамнозу и вызывают медленное подщелачивание лакмусового молока. [c.263]

    Продолжительность свертывания молока при внесении 3% закваски, ч Предел кислотооб-разовшия, °Т Рост в лакмусовом молоке Образование ЫНз из аргинина [c.6]

    Оптимальная температура развития 28-—32Х, максимальная — 40—43°С. минимальная — 10Х и иногда да КС несколько ниже. При впесеиии культуры петлей в 10 мл молока и при оптимальной тем-лературе активные штаммы свертывают молоко за 10—12 ч, образуя ровный плотный сгусток. Через 18 ч кислотность сгустка достигает 80—90 Т, а через 5—7 дней— 100—125 Т. При внесении 37о культур свертывание молока наступает через 4—7 ч. S. la tis восстанавливает и свертывает лакмусовое молоко, не образует ацетойна, растет при [c.9]

chem21.info

Лакмусовое молоко, приготовление - Справочник химика 21

    Лучшая по качеству бордоская жидкость получается, когда раствор медного купороса вливается тонкой струей в известковое молоко. Для приготовления на технических весах отвешивают 1 г негашеной извести. Затем ее гасят небольшим количеством воды, добавляют еще 30...40 мл и растирают массу до получения известкового молока, которое через марлю переливают в колбу вместимостью 200 мл. Отдельно отвешивают 1 г медного купороса, растворяют в 40...50 мл воды, добавляют жидкости до 100 мл и тонкой струей выливают медленно при тщательном помешивании в известковое молоко. Суспензия должна иметь нейтральную или слабощелочную реакцию. В нее опускают лакмусовую бумагу или железный гвоздь. Если бумага краснеет, а гвоздь покрывается налетом меди, добавляют известковое молоко. [c.86]     Бордоская жидкость. Основная сернокислая медь с примесью гипса. Жидкость голубого цвета, получается при смешивании раствора медного купороса с известковым молоком. Правильно приготовленная бордоская жидкость должна иметь нейтральную или слабощелочную реакцию. Бордоскую жидкость готовят перед употреблением. В практике обычно берут медный купорос и известь в соотношении 1 1, при этом приготовленный раствор медного купороса медленно вливают при помешивании в известковое молоко (если вливать известковое молоко в раствор медного купороса, то будут образовываться крупные частицы и суспензия станет нестабильной и непригодной для употребления). Реакцию бордоской жидкости проверяют лакмусовой бумажкой [c.110]

    Для приготовления 100 л 1%-ной бордоской жидкости берут 1 кг медного купороса, растворяют в неметаллической посуде в 50 л воды. В другой посуде гасят 1 кг извести небольшим количеством воды, а затем добавляют остальную (до 50 л) воду. Раствор медного купороса вливают, помешивая, тонкой струей в известковое молоко (а не наоборот). Получается суспензия голубого цвета. В случае кислой реакции к полученной жидкости добавляют известковое молоко с тем, чтобы получить нейтральную или слабощелочную реакцию. Реакцию определяют с помощью синей лакмусовой бумажки. Если бордоская жидкость приготовлена правильно, то бумажка не должна окрашиваться в красный цвет. Используют только свежеприготовленные смеси бордоской жидкости с фосфорорганическими препаратами. Нельзя применять с препаратами, содержащими мыло. Малоядовито. Опрыскивают за 15 дней до сбора урожая. [c.275]

    Исходя из указанного выше, рекомендуется при приготовлении бордоской жидкости вливать раствор медного купороса в известковое молоко. При наличии доброкачественной извести реакция бордоской жидкости должна быть нейтральной или слабощелочной, а цвет суспензии — голубой. Реакцию суспензии определяют лакмусовой бумажкой или железным предметом (нож, гвоздь), предварительно очищенным наждаком. Синяя [c.88]

    После приготовления бордоской жидкости проверяют ее реакцию (синяя лакмусовая бумажка не должна изменять свою окраску, а железный предмет не должен покрываться медью). Бордоскую жидкость с кислой реакцией нейтрализуют известковым молоком. [c.242]

    Бордоская жидкость. Фунгицид. Для авиационнохимической борьбы с помощью самолетов и вертолетов применяют 3—5-процентную бордоскую жидкость. Для получения 100 л бордоской жидкости растворяют 3—5 кг медного купороса в 50 л воды. Отдельно готовят известковое молоко, для чего в 30 л воды растворяют 3—5 кг негашеной извести. Затем раствор медного купороса вливают в приготовленное известковое молоко, доводят до 100 л и тщательно перемешивают. Нельзя смешивать растворы теплые, так как при этом получают крупные быстрооседающие и плохо прилипающие к листьям частицы. Правильно приготовленная бордоская жидкость имеет нейтральную или слабощелочную реакцию (лакмусовая красная бумажка слегка синеет). Если реакция кислая, надо добавить известкового молока. Бордоскую жидкость используют только свежеприготовленную. Ее не следует применять совместно с препаратами, содержащими мыло. Добавление к бордоской жидкости эфирсульфоната для одновременной борьбы с клещами способствует лучшему растеканию капель такого комбинированного препарата. [c.101]

    Как фунгицид в чистом виде используется весьма ограниченно для ранневесеннего опрыскивания персика в борьбе с курчавостью листьев, дезинфекции ран плодовых деревьев и дезинфекции посадочного материала, пораженного корневым раком. Наиболее широко применяется в виде бордоской жидкости, приготовляемой непосредственно в хозяйствах. Получают ее при смешивании раствора медного купороса с известковым молоком. Для приготовления широко используемой 1 %-ной бордоской жидкости берут 1 кг медного купороса и 1 кг свежегашеной извести. При плохом качестве извести количество ее увеличивают до 1,5—2 кг. Правильно приготовленная бордоская жидкость должна иметь нейтральную или слабощелочную реакцию, что можно определить с помощью лакмусовой или фенолфталеиновой бумаги. [c.336]

chem21.info

Дифференциально-диагностические среды

Дифференциально-диагностические среды — это специальные смеси питательных веществ, применяемые для определения видовой принадлежности микробов и изучения их свойств. При росте бактерий на дифференциально-диагностических средах протекают химические процессы, обусловленные наличием у микробной клетки различных ферментов. Одни из них способны расщеплять белки, другие — углеводы, третьи — вызывать реакции окисления и восстановления и т. д. Благодаря действию ферментов в дифференциально-диагностической среде происходят соответствующие изменения.

Дифференциально-диагностические среды можно разделить на четыре основные группы.

дифференциально-диагностические средыРис. 1—6. Различные формы расщепления желатины. Рис. 7 — 9. Жидкая среда с углеводом и индикатором Андраде: рис. 7 — отсутствие ферментации; рис. 8 — ферментация с образованием кислоты; рис. 9 — ферментация с образованием кислоты и газа. Рис. 10 — 12. Полужидкая среда с углеводом и индикатором BP (из сухой питательной среды): рис. 10 — отсутствие ферментации; рис. 11 — ферментация с образованием кислоты; рис. 12 — ферментация с образованием кислоты и газа. Рис. 13—15. Искусственная лакмусовая сыворотка по Зейтцу: рис. 13 — отсутствие ферментации; рис. 14 — ферментация с образованием кислоты; рис. 15 — ферментация с образованием щелочи. Рис. 16 и 17. Молоко с метиленовым синим: рис. 16 — отсутствие редукции; рис. 17 —редукция. Рис. 18 и 19. Среда Симонса: рис. 18 —отсутствие ассимиляции цитрата; рис. 19 — ассимиляция цитрата. Рис. 20 — 24. Лакмусовое молоко: рис. 20 — отсутствие ферментации; рис. 21 — ферментация с образованием кислоты; рис. 22 — ферментация с образованием щелочи; рис. 23 — пептонизация; рис. 24 — редукция. Рис. 25. Разжижение свернутой сыворотки (в проходящем свете). Рис. 26. Гемолиз на кровяном агаре (в проходящем свете). Рис. 27. Кровяная среда с теллуритом калия.

1. Среды, содержащие белок и выявляющие способность микробов расщеплять белки (протеолитические Свойства): мясо-пептонная желатина «столбиком», свернутая лошадиная или бычья сыворотка, молоко, кровяной агар. При посеве бактерий проколом в мясо-пептонную желатину, «столбиком» в случае расщепления белка наблюдают разжижение среды. При посеве на среду со свернутой сывороткой расщепление белка определяют по разжижению среды и образованию углублений на ее поверхности. Расщепление микробом молока выявляется просветлением или растворением первоначально свернувшегося молока. Наличие гемолитической активности исследуемой культуры проверяют посевом ее в чашку Петри на специальный кровяной агар. В результате разрушения эритроцитов вокруг колоний (например, гемолитического стрептококка или стафилококка) образуются зоны просветления. 2. Среды для выявления способности микробов расщеплять углеводы и высокоатомные спирты (Эндо среда, Левина среда, Расселла среда, Дригальского — Конради среда, Рапопорт — Вайнтрауба среда, Шустовой среда). Для выявления этих свойств микроорганизмов применяют также «пестрый» ряд, т. е. серию пробирок, содержащих питательные среды, включающие различные углеводы, многоатомные спирты и индикатор. В качестве индикаторов пользуются лакмусовой настойкой или бромтимоловым синим. Разложение какого-либо из углеводов с образованием кислоты выявляют по изменению цвета индикатора, образование газа— по заполнению газом и всплыванию специального стеклянного поплавка в жидкой среде. Или применяют полужидкие Гисса среды (см.) с 0,5% агара с соответствующими сахарами и индикатором Андраде. После посева микроба на эти среды образование кислоты выявляют покраснением среды, а образование газа — по появлению его пузырьков в агаре или по разрыву и сдвигу вверх агарового столбика. К дифференциально-диагностическим средам  второй группы относят также крахмальный агар, служащий для определения способности микробов расщеплять крахмал, среду Кларка и др. 3. Среды, на которых выявляется способность микробов обесцвечивать красители, добавленные к бульону: метиленовый синий, тионин, лакмус, индигокармин, нейтральный красный или другие (среда Ротбергера, среда Омелянского). К третьей группе относят также среды с нитратами, служащие для определения способности микробов восстанавливать соли азотной кислоты (нитраты) в соли азотистой кислоты (нитриты) и далее в аммиак или свободный азот. 4. Среды, выявляющие способность микробов усваивать вещества, которые не усваиваются другими микробами, например среда с лимоннокислым натрием (цитратный агар Симонса) для отличия кишечной палочки, которая лишена способности ассимилировать эту среду, от других бактерий кишечной группы или среда с олеиновокислым натрием для дифференциации дифтерийной палочки от ложно дифтерийной и дифтероидов (агар Энжеринга).

К дифференциально-диагностическим средам относят также среды для дифференциации анаэробов, теллуритовые среды для дифференциации дифтерийных бактерий, среды с мочевиной, щелочные среды (Дьедонне агар) для культивирования холерного вибриона и др. См. также   Идентификация микробов.

www.medical-enc.ru

Лекция 2. Характеристика основных представителей микрофлоры молочных продуктов молочнокислые стрептококки

ГОМОФЕРМЕНТАТИВНЫЕ МОЛОЧНОКИСЛЫЕ СТРЕПТОКОККИ

Молочный стрептококк. Str. lactis. Форма клеток в молоке — оваль­ные кокки величиной от 0,5 до 1 мк, соединенные попарно или в ви­де коротких цепочек . Хорошо окрашиваются обычными крас­ками, красятся по Граму, неподвижны, спор не образуют. На плот­ных питательных средах образуют колонии: поверхностные — мел­кие (диаметром до 1 мм), круглые, светлые, глубинные — чечевице-образные. Оптимальная температура развития 25—30° С, максимальная 40° С, минимальная 10° С и иногда несколько ниже. При внесении культуры петлей в 10 мл молока и при оптималь­ной температуре активные штаммы свертывают молоко за 10—12 ч, образуя плотный ровный сгусток. Через 18 ч кислотность сгустка до­стигает 80—90° Т, а через 5—7 дней — 100—125° Т. Str. lactis — основной компонент микрофлоры заквасок для тво­рога, сметаны, простокваши. Он входит также в состав микрофлоры кефирного грибка. Str lactis восстанавливают и свертывают лакмусовое молоко, не образуют ацетоина, растут при 39° С и при наличии 4% NaCl обра­зуют значительное количество кислоты, разлагают аргинин с выде­лением аммиака; не развиваются в среде, в которой содержится 6,5% NaCl и в щелочной среде (при рН 9,5). Str. lactis используют в заквасках как активный кислотообразователь в начале процесса сквашпвания. Благодаря относительно низ­кому конечному пределу кислотообразования можно получить про­дукт со сравнительно невысокой кислотностью. Развитие Str lactis, попадающих в пастеризованное молоко с обору­дования, является основной причиной снижения стойкости питьево­го молока..

Разновидностью Str. lactis является Sir. lactis var. maltigenes, вызывающий образование в молоке и сливках солодового, хлебного запаха. Установлено, что хлебный запах обусловлен образованием 3-метилбутанола. Г. А. Харрисон, Е. А. Капрала и др. (1969) выявили наличие у этих микроорганизмов дегидрогеназы, обусловливающей образование 3-метилбутанола и 2-метилпропанола. Реакция эта оказалась необра­тимой, она ускорялась при добавлении лактозы и альдегидов.

Сливочный стрептококк Str. cremoris. Многие штаммы Str. сгеmoris отличаются от Str. lactis по морфологии клеток — они часто дают в молоке сочетание в виде цепочек. Форма колоний такая же, как и у Str. Lactis. Оптимальная температура развития 25—30° С. максимальная 36° С, предельная кислотность молока 110—115° С. При пониженных температурах культивирования (15—20° С) некоторые штаммы Str. cremoris образуют значительное количество летучих кислот; восста­навливают и свертывают (иногда только частично) лакмусовое мо­локо, дают отрицательную или лишь слабоположительную пробу на ацетон, не расщепляют аргинина, при 39° С не растут и в среде с 4% NaCl не развиваются или развиваются слабо. Развиваясь в молоке, Str. cremoris образует сгусток, напоминаю­щий по консистенции сметану. Это свойство Str. cremoris можно использовать при подборе заквасок для продуктов, характеризую­щихся густой консистенцией (сметана).

Термофильный молочнокислый стрептококк Str. thermophilus. Форма клеток в молоке — кокки, часто соединенные в длинные цепочки. По величине клетки не­сколько крупнее, чем клетки Str. lactis , что позволяет при­близительно разграничивать (по микроскопическому препарату) эти два вида при совместном раз­витии их в культуре. На агаре с гидролизованным молоком тер­мофильные молочнокислые стреп­тококки развиваются медленнее, чем мезофильные (через 48ч), и дают более мелкие колонии - темные, зернистые, иногда локопообразные (В. М. Богданов, 1959). Оптимальная температура развития 40—45° С; свертывает моло­ко при 50° С. При внесении культуры петлей в 10 мл молока и при оптимальной температуре активные штаммы свертывают молоко за 12—14 ч. Предел кислотообразования отдельных штаммов Str. ther­mophilus - 100-115° Т.

Str. thermophilus не развивается при наличии в молоке 0,1% метиленового голубого, не обесцвечивает лакмусовое молоко, образует ацетон в небольшом количестве (В. М. Богданов, 1959.б, Р. Любенау-Нестле н X. Маир-Вальдбург, 1966). В бульоне с глюкозой и 4% NaCl кислотообразование не наблюдается, а с 2% оно наблюдается только у некоторых штаммов.

Термофильные стрептококки применяют при производстве южной п мечниковской простокваши, йогурта, ряженки, варенца. Многие культуры отличаются способностью образовывать вязкие, иногда тягучие сгустки, но встречаются штаммы, образующие колющиеся сгустки.

Из-за сравнительно низкой энергии кислотообразования Str. thermophilus редко используют в чистой культуре, чаще их при­меняют в комбинации с молочнокислыми палочками — болгарской и ацидофильной или мезофильными молочнокислыми стрептокок­ками. Термофильные стрептококки могут попадать в молоко и не с за­квасками. По данным В. М. Богданова, В. Г. Геймберг и др. (1961), в молоке, пастеризованном при 73—76° С, значительную часть оста­точной микрофлоры составляют термофильные стрептококки. Вслед­ствие довольно низкой биохимической активности термофильный стрептококк, содержащийся в пастеризованном молоке, по-видимо­му, не играет большой роли в снижении стойкости питьевого молока, а также в формировании качества ряда кисломолочных продуктов. Однако в таких продуктах, как ацидофильное молоко, при производ­стве которого сквашивание осуществляют при высоких температу­рах с участием чистых культур ацидофильной палочки, нередко воз­никает порок, выражающийся в потере типичности вкуса и конси­стенции, обусловленный развитием стрептококков. По-видимому, в данном случае причиной порока является именно термофильный стрептококк .

Энтерококки.

В группу энтерококков входят Str. faecalis, Str. faecium, Str. liquefaciens, Str. zymogenes, Str. durans. К ним относятся также два вида стрептококков, составляющих нормальную микро­флору кишечника крупного рогатого скота — Str. bovis — и лоша­дей — Str. equinus (Г.П. Калина и А. П. Калина, 1969). Форма клеток — диплококки, реже короткие цепочки, коло­нии — прозрачные, голубоватые, иногда мутноватые с ровными краями. Эти бактерии развиваются как при 10° С, так и при 45° С. Выдерживают нагревание до 63° С в течение 30 мин, гибнут при 85° С с кратковременной выдержкой при этой температуре. При ми­нимальном обсеменении и оптимальной температуре свертывают мо­локо в течение 20—24 ч, иногда и более. Предельная кислотность 80—100°Т (В. М. Богданов, 1959). Лакмусовое молоко восстанав­ливают и свертывают. Развиваются при наличии в молоке 0,1% метиленового голубого, 6,5% NaCl и при рН 9,6, образуют из аргинина аммиак.. Str. liquenfaciens (маммококк) выделяет сычужный фер­мент, в результате чего, молоко свертывается при сравнительно низ­кой кислотности, при этом образуются пептиды, придающие продук­ту горький вкус. В большом количестве энтерококки находятся в сыром молоке, часть из них выдерживает пастеризацию, поэтому они всег­да обнаруживаются в пастеризованном молоке и молочных про­дуктах. При оценке качества питьевой воды и некоторых пищевых про­дуктов наличие энтерококков рассматривается как показатель фе­кального загрязнения (Г. П. Калина, А. П. Калина, 1969). Не исклю­чена возможность применения этого теста и для характеристики санитарно-гигиенического качества молочных продуктов (Э. С. Дербинова. 1969, П. К. Полищук, 1971). Однако ценность его снижается из-за высокой термостойкости энтерококков и их способ­ности размножаться в молоке (Н. С. Королева, В. Ф. Семенихина, 1972). Многие авторы пытались использовать энтерококки для приго­товления молочных продуктов — сыров, а также лечебных кисломолочных продуктов (Л. А. Банникова и И. Н. Пятницына, 1960). За рубежом разработаны сухие молочные препараты, в состав микро­флоры которых входят энтерококки (релактон в ЧР, лактобацпллин в Англии). Н. Н. Седова (1969) установила, что энтерококки безвредны для человека и оказывают определенное профилактиче­ское действие па работу кишечника. Исключение составляли лишь культуры Str. faecalis var. liquefaciens, при употреблении которых до 70% случаев (для отдельных штаммов) наблюдались пищевые токсикоинфекции.

Наиболее надежным признаком дифференциации является серо­логическая реакция. По классификации Ленсфильда все истинные молочнокислые стрептококки относятся к серологической группе N, энтерококки — к группе D.

ГЕТЕРОФЕРМЕНТАТИВНЫЕ МОЛОЧНОКИСЛЫЕ СТРЕПТОКОККИ

Str. diacetilactis. Клетки расположены чаще всего в виде диплококков и коротких цепочек. На питательных средах образуют колонии: поверхностные, крупные, каплевидные, глубинные—чечевицеобразные. Установлено (Л. А. Луковникова, 1962), что при росте на плот­ной питательной среде, содержащей 3% агара, Str. diacetilactis обра­зуют глубинные колонии в виде паучков или комочков ваты, напоми­нающие колонии молочнокислых палочек. Этим можно пользоваться для дифференциации Str. diacetilactis от молочнокислых стрептокок­ков других видов. Оптимальная температура развития в молоке 25—30° С. Str. diacetilac­tis растет при 39—40° С, при температуре 45° С рост отсутствует. Предельная кислотность 90—100° Т.

При внесении петлей 10 мл молока активные штаммы свертывают молоко через 16—18 ч, менее активные — через 24—48 ч. Сгусток молока плотный, часто с наличием пузырьков газа. Вкус чистый, кисловатый, слегка щиплющий, иногда сладковатый. Аромат специ­фический, обусловленный накоплением диацетила. Лакмусовое мо­локо свертывают и восстанавливают.Реакция может быть нетипич­ной: сначала наступает порозовение и свертывание, затем более или менее быстрое обесцвечивание. Штаммы Str. diacetilactis сбраживают лактозу, соли лимонной кислоты с образованием С02, а также и диацетила и ацетоина. Большей частью разлагают аргинин с вы­делением аммиака, устойчивы к наличию в среде 4% NaCl. Str. diace­tilactis вводят в закваску для творога, сметаны, простокваши. До сих пор нет единого мнения о том, относятся ли Str. diacetilactis к группе гетсроферментативных или гомоферментативных стрепто­кокков. По способности образовывать значительное количество мо­лочной кислоты они приближаются к Str. lactis, а по способности образовывать побочные продукты брожения — к гетероферментативным стрептококкам. Ц. А. Е. Бриггсом (1952) установлена серологиче­ская идентичность их со Str. lactis и Str. cremoris. На близость Str. diacetilactis к Str. lactis указывают также получаемые из них му­танты, не способные сбраживать цитраты (Дж. М. Шерман, 1955). Однако В. Коллинз и Харвей (1962) установили, что в расщеплении цитратов участвуют два фермента — цитратаза и цитратпермеаза. Первый фермент превращает цитрат в уксусную и щавелевоуксусную кислоты, а второй — осуществляет транспортировку цитрата в клет­ку через клеточный барьер. Мутанты Str. diacetilactis, не расщепля­ющие цитрат, содержат цитратазу, но не продуцируют цитратпермеа-зу. Str. lactis и Str. cremoris не продуцируют ни одного из этих фер­ментов. Таким образом, по ферментным системам Str. diacetilactis существенно отличаются от гомофермеитативиых стрептококков. И. И. Климовский с соавторами (1969) выявил также отличия в протеолитичсской активности и характере продуктов протеолпза у Str. diacetilactis и Str. lactis. У штаммов Str. diacetilactis была от­мечена разница в способности образовывать диацетил. Многие штам­мы не продуцируют диацетила, но продуцируют много ацетоипа. М. И. Пнменова (1957) предложила такие штаммы объединить в от­дельный вид — Str. acetoinicns. Введение в закваски Str. acetoinicus позволяет улучшить их вкус. В СССР этот микроорганизм широко исполь­зуют при составлении заквасок для творога, сметаны, простокваши.

Leuc. citrovorum ( Str. citrovorus (Хаммер, 1928) и Leuc. Dextranicum Sir. paracitrovorus (Хаммер, 1928). Клетки шарообразные, соединены в пары и цепочки. Величина клеток — как у Str. lactis, редко — меньше. На агаре образуют мелкие сероватые колонии, на среде с лимоннокислым кальцием — более крупные, каплевидные, окруженные зоной просветления в результате сбраживания лимонно­кислого кальция. Оптимальная температура роста 25—30° С, хорошо растут и при 20—21° С; при температуре 45° С не развиваются. Молоко свертыва­ют редко, обычно максимальная кислотность не превышает 40— 50° Т. Не образуют аммиака из аргинина. Сбраживают лимонную кислоту и ее соли с образованием ацетоина, диацетила, 2-3-бутилен-гликоля, уксусной кислоты, углекислого газа.

Входя в состав микрофлоры естественной кефирной закваски. Leuc. citrovorum и Lenc. dextranicnra играют большую роль в образовании вкуса и аромата кефира. В случае излишнего их развития наблюда­ется вспучивание.

studfiles.net


Смотрите также