Открыть в отдельном окне

Значения средние ± SE

^{a :} p<0,05 по сравнению с контрольной группой

Оптимальный профилактический подход к борьбе с раком. Хотя рацион человека содержит компоненты, способствующие развитию рака, он также содержит компоненты, которые могут его предотвратить (2). Наблюдения в исследованиях на животных показали, что молочный жир снижает частоту возникновения химически индуцированных опухолей (14). До сих пор не сообщалось об определении ферментов у животных, получавших соевое или козье молоко с экспериментально индуцированным гепатоканцерогенезом. Из результатов, полученных в настоящей работе, следует, что соевое и козье молоко уменьшали тяжесть канцерогенеза, что отражалось в снижении активности ферментов онкомаркеров плазмы, то есть ГГТ и ЩФ (8–10). На массу тела влияли различные методы лечения. Снижение веса также наблюдалось у крыс, которым давали только сою и козье молоко. Это может свидетельствовать о том, что соевое и козье молоко можно использовать для снижения или поддержания массы тела.

Молочные коровы или козы способны извлекать из корма потенциальные антиканцерогенные вещества, такие как бета-каротин, бета-ионон и госсипол, и переносить их в молоко(2). В исследованиях на животных, сравнивающих канцерогенный потенциал молочного жира или сливочного масла с богатыми линолевой кислотой растительными маслами или маргаринами, было выявлено меньшее развитие опухолей при употреблении молочных продуктов (2).

Изолят соевого белка подавляет рост опухолей предстательной железы человека, трансплантированных мышам (14). в естественных условиях сообщалось об ингибировании заболеваемости или прогрессирования рака соевыми продуктами или чистым изофлавоном при раке желудка (15), лейкемии (16), раке груди (17) и других заболеваниях (18). Напротив, некоторые исследования не выявили ингибирующего действия сои на онкогенез in vivo . Mc Intosh et al (19) и Rao (20) сообщили в своих исследованиях, что диетическое лечение на основе сои оказывает стимулирующее действие на опухоли. Здесь мы сообщаем о влиянии добавок сои на химически индуцированный гепатокарциногенез. Сравнение действия соевого и козьего молока не дает большой разницы. Различия активности ЩФ и ГГТ в обоих вариантах лечения не были достоверными. Интересно отметить, что эффект соевых бобов подобен козьему молоку.

Механизм действия, предполагаемый для защитного эффекта соевого и козьего молока при канцерогенезе, аналогичен витамину Е или С и другим антиоксидантам. Потенциальные механизмы включают удаление свободных радикалов, образующихся при гепатоканцерогенезе. Хорошо известно, что антиоксиданты задерживают или ингибируют окисление и перекисное окисление липидов.

В заключение, добавление соевых бобов и козьего молока вызвало снижение тяжести канцерогенеза, что указывает на защитный эффект сои и козьего молока у крыс, индуцированных гепатоканцерогенезом. Полученные результаты свидетельствуют о том, что соевое и козье молоко эффективно действуют как противораковые агенты при гепатоканцерогенезе, хотя требуются дальнейшие исследования.

Авторы благодарят Malaysian Animals Genetics Sdn. Bhd. на поставку козьего молока, а также на краткосрочный грант UPM (1998 г.).

1. Хаканссон А., Борис З., Стен О., Хемант С. Апоптоз, индуцированный белком грудного молока. Издание Национальной академической науки США. 1995; 92: 8064–68. [Google Scholar]

2. Parodi PW. Жировые компоненты коровьего молока как потенциальные антиканцерогенные агенты. Журнал питания. 1997;127(6):1055–60. [PubMed] [Google Scholar]

3. Wang H, Murphy PA. Изофлавоновый состав американской и японской сои в Айове: влияние сорта, года урожая и местоположения. Дж. Агрик. Пищевая хим. 1999;42:1647–77. [Google Scholar]

4. Кеннеди А.Р. Доказательства эффективности соевых продуктов в качестве профилактических средств от рака. Дж. Нутр. 1995; 125:733S–743S. [PubMed] [Google Scholar]

5. Мессина М.Дж., Перски В., Сетчелл К.Д., Барнс С. Потребление сои и риск рака: обзор данных in vitro и in vivo . Нутр Рак. 1994; 21:113–31. [PubMed] [Google Scholar]

6. Рао А.В., Сун М.К. Сапонины как антиканцерогены. Дж. Нутр. 1995; 125:717S–724 S. [PubMed] [Google Scholar]

7. Шамсуддин А.М. Инозитолфосфатаза обладает новой противораковой функцией. Дж. Нутр. 1995; 125:725S–732S. [PubMed] [Google Scholar]

8. Хендрих С., Пито Х.К. Ферменты метаболизма глутатиона как биохимические маркеры гепатоканцерогенеза. Обзоры рака и метастазов. 1987; 6: 155–78. [PubMed] [Google Scholar]

9. Мосс Д.В. Множественные формы кислой и щелочной фосфатазы: генетика, экспрессия и тканеспецифическая модификация. Клин Чим Акта. 1986; 161: 123–35. [PubMed] [Академия Google]

10. Рахмат Асмах, Нга Ван Зурина Ван, Шамаан Нор Арипин, Гапор Абдул, Кадир Халид Абдул. Длительное введение токотриенолов и активности ферментов онкомаркеров во время гепатокарциногенеза у крыс. Питание. 1993; 9: 229–32. [PubMed] [Google Scholar]

11. Солт Д., Фарбер Э. Новый принцип анализа химических канцерогенов. Природа. 1976; 263: 701–3. [Google Scholar]

12. Джейкобс WLW. Колориметрический анализ гамма-глутамилтранспептидазы. Клин Чим Акта. 1971;31:175–79. [PubMed] [Google Scholar]

13. Джахан М., Баттерворт П.Дж. Щелочная фосфатаза куриных почек. Фермент. 1986; 35: 61–69. [PubMed] [Google Scholar]

14. Zhou JR, Gugger ET, Tanakan T, Guo Y, Blackburn GL, Clinton SK. Фитохимические вещества сои ингибируют рост трансплантируемой карциномы предстательной железы человека и ангиогенез опухоли у мышей. Дж. Нутр. 1999; 129:1628–35. [PubMed] [Google Scholar]

15. Янагихара К., Ито А., Тоге Т., Нумото М. Антипролиферативные эффекты изофлавонов на линии раковых клеток человека, полученные из желудочно-кишечного тракта. Рак Рез. 1993;53:5815–21. [PubMed] [Google Scholar]

16. Jing Y, Nakaya K, Han R. Дифференциация клеток промиелоцитарного лейкоза HL-60, индуцированных даидзеином, в vitro и в vivo . Противораковый Рез. 1993; 13:1049–54. [PubMed] [Google Scholar]

17. Hawrylewicz EJ, Zapata JJ, Blair WH. Соя и экспериментальный рак: исследования на животных. Дж. Нутр. 1995; 125:698С–708С. [PubMed] [Google Scholar]

18. Clinton SK, Destree R, Anderson DB, Truex CR, Imrey PB, Visek WJ. 1,2-диметилгидразин-индуцированный рак толстой кишки у крыс, которых кормили говядиной или растительным белком. Нутр. Представитель междунар. 1979;20:335–42. [Google Scholar]

19. McIntosh GH, Regester GO, Le Leu RK, Royle PJ, Smithers GW. Молочные белки защищают крыс от рака кишечника, вызванного диметилгидразином. Дж. Нутр. 1995; 125:809–16. [PubMed] [Google Scholar]

20. Rao CV, Wang CX, Simi B, Lubet R, Kelloff G, Steele V, Reddy BS. Усиление экспериментального рака толстой кишки генистеином. Рак Рез. 1997; 57: 3717–22. [PubMed] [Google Scholar]

Противораковая активность коровьего, овечьего, козьего, кобыльего, ослиного и верблюжьего молока и их казеинов и сывороточных белков, а также сравнение казеинов in silico

Мол Биол Рес Общ. 2017 июнь; 6(2): 57–64.

Информация об авторе Информация об авторских правах и лицензии Отказ от ответственности

Настоящее исследование было проведено для оценки противораковой активности коровьего, козьего, овечьего, кобыльего, ослиного и верблюжьего молока и их казеина и сывороточных белков в отношении клеточной линии MCF7. Были также исследованы структурные свойства белков казеина с использованием инструментов биоинформатики, чтобы найти объяснение их противоопухолевой активности. Влияние различных видов молока и содержащихся в них казеиновых и сывороточных белков на пролиферацию MCF7 измеряли с помощью анализа МТТ при различных концентрациях (0,5, 1 и 2 мг/мл). Результаты показали, что кобылье, ослиное, коровье и верблюжье молоко и его казеин и сывороточные белки обладают мощной цитотоксической активностью в отношении клеток MCF7 дозозависимым образом, в то время как овечье и козье молоко и их белки не проявляют цитотоксической активности. 9Результаты 0015 in silico показали, что кобылий, ослиный и верблюжий казеины имеют самые высокие положительные и отрицательные заряды. Прогнозирование вторичной структуры показало, что казеины кобылы и осла имеют максимальный процент α-спирали, а казеин верблюда имеет самый высокий процент удлиненной цепи. Это исследование показывает, что существует поразительная корреляция между противораковой активностью молочных казеинов и их физико-химическими свойствами, такими как структура альфа-спирали и положительные и отрицательные заряды. В заключение, результаты показали, что кобылье, верблюжье и ослиное молоко могут быть хорошими кандидатами против клеток рака молочной железы.

Ключевые слова: Молоко, казеин, сывороточные белки, анализ MTT, In silico исследование

Рак является одним из наиболее распространенных злокачественных новообразований во всем мире. Поэтому крайне необходимы открытие и разработка новых противоопухолевых агентов с новыми механизмами действия. Во многих исследованиях сообщалось, что компоненты молока обладают биологическими свойствами, выходящим за рамки их пищевой ценности. Биологические функции молока в основном обусловлены молочными пептидами и белками. Белки молока включают примерно 20% сыворотки и 80% казеина. Сыворотка содержит пять основных белков, включая α-лактальбумин, гликомакропептид, β-лактоглобулин, иммуноглобулины и сывороточный альбумин. Казеин содержит αs1, αs2, β и κ казеин [1]. Было несколько сообщений об антибактериальной, противовирусной, противогрибковой и антиоксидантной активности казеина и белков молочной сыворотки [2]. 9[3-5]. Несколько исследований также показали, что сывороточные белки, такие как лизоцим, лактоферрин и бычий сывороточный альбумин, обладают эффективной противоопухолевой активностью. Xueying Mao et al. сообщили, что сывороточные белки ослиного молока обладают мощной антипролиферативной активностью против рака легких. Пять разных казоморфинов; Также сообщалось, что αs1-CN (f90–95), αs1-CN (f 90–96), β-казоморфин-7, β-казоморфин-7 (f1-5) и морфицептин ингибируют пролиферацию клеток клеточной линии рака молочной железы человека. [6, 7]. Однако до сих пор не было представлено ни одного научного исследования активности ослиного, козьего, овечьего и кобыльего молока в отношении клеток MCF7. В настоящем исследовании казеин и сывороточные белки ослиного, верблюжьего, овечьего, козьего, коровьего и кобыльего молока были выделены и инкубированы с клеточными линиями рака молочной железы (MCF7). Было исследовано влияние шести различных видов молока (ослиного, верблюжьего, овечьего, козьего, коровьего и кобыльего) и содержащихся в них казеинов и сывороточных белков на ингибирование роста клеток MCF7. Кроме того, в настоящем исследовании также были изучены различные свойства казеина с использованием инструментов биоинформатики, чтобы найти объяснение их противоопухолевой активности.

Переработка молока: Молоко с разных ферм в Исфахане (Иран) использовалось в этом исследовании. Пробы молока собирали и нагревали на водяной бане с термостатом при температуре предварительной пастеризации 63°С в течение 20 мин и охлаждали до 4°С. Образцы хранились при температуре -20ºC до проведения анализа [6]. Обезжиренное молоко готовили из парного молока путем центрифугирования при 5000× g в течение 20 мин при 4°С и отжимании жирового слоя [5]. Цельный казеин молока получали из обезжиренного молока путем доведения рН до 4,6 (изоэлектрическая точка казеина) и центрифугировали при 8000×9.0015 г на 20 мин при 20ºС для получения супернатанта белков молочной сыворотки [8]. Сывороточные белки получали после осаждения казеинов. Сывороточные белки промывали и трижды центрифугировали, затем их рН доводили до 6,8 с помощью 1 н. NaOH [5]. Затем казеин и сывороточные белки лиофилизировали и хранили при -20°С [6].

Клеточная культура и анализ цитотоксичности: клеточных линий MCF-7 (рак молочной железы человека) были приобретены в Национальном банке клеток Института пастбищ, Тегеран, Иран. Линии клеток поддерживали в RPMI с добавлением 10% (об./об.) термоинактивированной фетальной телячьей сыворотки (FBS), 100 ед. мл ^-1 пенициллин и 100 мкг мл ^-1 стрептомицин и 5 мМ L-глутамин. Линии клеток поддерживали при 37ºC во влажном инкубаторе (N-Biotek Korea), содержащем 5% CO ₂ , в условиях отсутствия Mycoplasma [9].

Влияние различных концентраций (0,5, 1 и 2 мг/мл) белков молока, казеина и сыворотки на клетки MCF-7 определяли с помощью модифицированного 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2, Анализ бромида 5-дифенилтетразолия (МТТ) [10]. После 48 ч инкубации при 37°С в каждую лунку добавляли раствор МТТ (5 мг/мл) и инкубировали планшет в течение 4 ч. Наконец, 50 мкл PrOH/HCl/TX (0,04 М HCl в 2-пропаноле плюс 10% Triton X-100) добавляли для растворения образовавшихся кристаллов формазана [11]. Планшет повторно инкубировали в течение 24 часов и определяли количество кристаллов формазана путем измерения оптической плотности при 49°С. 2 нм с использованием спектрофотометра для микропланшетов (Awareness Technology Inc., стат.факс 2100). Весь материал был закуплен у компании Gibco (Германия). Процент выживших клеток рассчитывали следующим образом: Жизнеспособность клеток = (AобработанныйAконтроль) × 100

Поиск целевых аминокислотных последовательностей и множественное выравнивание последовательностей: белков казеина альфа S1 от овец, коз, коров, верблюдов, лошадей и ослов были проанализированы в настоящем исследовании. Белковые последовательности доступны в NCBI. Номера доступа и количество аминокислот αs1-казеина показаны на . CLUSTAL Omega в Европейском институте биоинформатики использовался для создания множественного выравнивания последовательностей [MSA] последовательностей белка казеина альфа S1 из шести различных видов [12].

Таблица 1

Записи о последовательности белков молока в базе данных NCBI и количестве аминокислот

Белок	Белки, инвентарные номера	Количество аминокислот
αs1-казеин [ Босс Телец ]	{«type»:»entrez-protein»,»attrs»:{«text»:»ABW98936. 1″,»term_id»:»159793183″,»term_text»:»ABW98936.1″}}ABW98936.1	214
αs1-казеин [ Эквус Кабаллюс ]	{«type»:»entrez-protein»,»attrs»:{«text»:»AAK83668.1″,»term_id»:»195″,»term_text»:»AAK83668.1″}}AAK83668.1	212
αs1-казеин [ Эквус азиатский ]	{«type»:»entrez-protein»,»attrs»:{«text»:»P86272.1″,»term_id»:»238055131″,»term_text»:»P86272.1″}}P86272.1	217
αs1-казеин [ Верблюд дромедариус ]	{«type»:»entrez-protein»,»attrs»:{«text»:»CAA10077. 1″,»term_id»:»3860335″,»term_text»:»CAA10077.1″}}CAA10077.1	222
αs1-казеин [ Капра белоснежная ]	{«type»:»entrez-protein»,»attrs»:{«text»:»CAD45345.1″,»term_id»:»22796155″,»term_text»:»CAD45345.1″}}CAD45345.1	214
αs1-казеин [ Овен ]	{«type»:»entrez-protein»,»attrs»:{«text»:»AEN84772.1″,»term_id»:»345422900″,»term_text»:»AEN84772.1″}}AEN84772.1	214

Открыть в отдельном окне

Конструкции филогенетического дерева: Clustal Omega представляет собой программу множественного выравнивания последовательностей белковых последовательностей, после чего выравнивание используется для проведения филогенетического анализа и отображения конечного филогенетического дерева. В исследовании Clustal Omega использовали для получения филогенетических анализов 6 последовательностей казеиновых белков у млекопитающих [12].

Предсказание вторичной структуры: GOR IV в EXPASY, YASPIN из Центра интегративной биоинформатики VU и PressAPro в Лаборатории биоинформатики и вычислительной биологии Института пищевых наук, CNR, Италия, были использованы для предсказания вторичных структур последовательностей казеина альфа S1 [13]. -15].

Физико-химические свойства: Расчетное значение pH изоэлектрической точки (pI), молекулярные массы и положительный и отрицательный заряд белков определяли с помощью инструмента protparam в базе данных белков «SwissProt & TreMBL» [16]. NetSurfP использовался для определения доступной площади поверхности всех белков. Сервер NetSurfP предоставил информацию об открытых и скрытых аминокислотах белков [17].

Статистический анализ: Значения представлены как среднее ± стандартное отклонение (SD). Анализ дисперсии с последующим тестом LSD использовали для оценки значимости между тестируемым образцом и контрольным растворителем. P <0,05 считалось статистически значимым.

Козье, коровье, верблюжье, овечье, кобылье и ослиное молоко и содержащиеся в них казеин и сывороточные белки были протестированы на цитотоксичность в отношении клеток MCF7. Все виды молока и белки тестировались в разных концентрациях (0,5, 1 и 2 мг/мл). Кобылье, ослиное, коровье и верблюжье молоко проявляло дозозависимую цитотоксическую активность в отношении клеток MCF7, в то время как овечье и козье молоко не проявляло цитотоксической активности. Самая высокая цитотоксическая активность казеинов наблюдалась у казеина кобыльего молока, за которым следовали верблюжье, ослиное и коровье (). Результаты исследований белков сыворотки показали, что белок верблюжьей сыворотки проявлял мощную противораковую активность, в то время как коровье и ослиное молоко проявляли слабую противораковую активность (12).

Открыто в отдельном окне

Цитотоксическая активность козьего, коровьего, верблюжьего, овечьего, кобыльего и ослиного молока в отношении клеток MCF7 ( 0,5 мг/мл, 1 мг/мл, 2 мг/мл

Открыто в отдельном окне

Цитотоксическая активность козьего, коровьего, верблюжьего, овечьего, кобыльего и ослиного казеина в отношении клеток MCF7 ( 0,5 мг/мл, 1 мг/мл, 2 мг/мл

Открыто в отдельном окне

Цитотоксическая активность козьего, коровьего, верблюжьего, сывороточные белки овцы, кобылы и осла против клеток MCF7 (0,5 мг/мл, 1 мг/мл, 2 мг/мл

Множественное выравнивание последовательностей было получено с использованием Clustal Omega с последовательностями казеина αs1, полученными из базы данных NCBI (), также результаты NCBI BLAST показали 44-89% идентичности последовательностей казеина. Соотношение последовательностей показало, что последовательности казеина αs1 не принадлежали к высококонсервативному семейству.

Открыть в отдельном окне

Множественное выравнивание последовательностей казеина альфа S1 козы, коровы, верблюда, овцы, кобылы и осла

Филогенетическая древовидная структура показывает, что эти белки были разделены на три отдельные группы. Члены этих двух групп не отличались большим разнообразием, и среди них наблюдается высокая идентичность последовательностей. Между этими двумя отдельными группами не было комбинации членов, что свидетельствует о том, что они были разделены на ранней стадии эволюции.

Открыть в отдельном окне

Филогенетическое дерево казеинов разных видов, построенное CLUSTAL omega.

Результаты показали, что типы казеина в основном отличались процентным содержанием альфа-спирали, бета-листа и случайного клубка. Оценочная вторичная структура с веб-серверов GorIV, PreSSApro и YASPIN для αs1-казеина составляла от 39 до 46% α-спирали; От 8 до 14% удлиненных прядей (подобных β-листам) и от 42 до 49% случайных витков (). У верблюжьего казеина был самый высокий процент удлиненной нити, а у овечьего и козьего — самый низкий процент в этом отношении. Максимальный процент α-спиралей был получен с казеинами лошади и осла, а минимальный процент был также получен с козьими и верблюжьими казеинами.

Таблица 2

: Предсказание вторичной структуры казеина альфа s1 с помощью GORIV, PreSSApro и YASPIN

αS1 Казеин	α-спираль (%)	Удлиненная прядь (%)	Случайная катушка (%)
Лошадь	46,85	10,21	42,92
	39,33	14.11 9.11 9.11 9.11 9.11 9.11 9.11 9.11 9.11 9. 11 9.11 9.11	14.11	14.11	14.11	14.11	14.11	14.11	14.11	14.11			39,33		14.11			.0069	46.54
Cow	42.59	10.74	45. 32
Goat	42.05	8.72	49.21
Sheep	42.46	9.19	48.28
Donkey	44.85	10.29	45.46

Открыть в отдельном окне

Алифатический индекс белков верблюжьего и коровьего казеина был явно выше, чем у других типов казеина. Результаты также показали, что положительные и отрицательные заряды этих типов казеина явно различались. Казеины лошади и осла имели самый высокий положительный заряд, за ними следовали казеины верблюда, коровы, овцы и козы. Самый высокий отрицательный заряд казеинов был получен у казеина верблюда, за ним следуют казеины осла, лошади, коровы, овцы и козы. Результаты зарытых и выставленных остатков были также получены NetsurfP (). Максимальный и минимальный проценты захороненных остатков были достигнуты коровьим и лошадиным казеином соответственно. И наоборот, конский и коровий казеины показали самый высокий и самый низкий процент экспонированных остатков соответственно.

Таблица 3

Физико-химические свойства казеина альфа S1 по протпараму

αS1 Казеин	МВт	Отрицательный заряд	Зарядка	Алифатический индекс
Лошадь	25. 30	32	28	82.83
Отметок	25.84449999969
	25.8444999999669
	25.844499999669
	25.844499669
	25.844449669
.0069	25	85.14
Cow	24. 53	32	21	85.19
Goat	24.27	26	20	82.06
Sheep	24.30	27	21	83.88
Donkey	25.96	33	29	80. 92

Open in a separate window

Таблица 4

Процент скрытых и открытых остатков казеина альфа s1 по данным NetsurfP

αS1 Казеин	Похоронен%	Открытый%
Horse	40.09%	59.90%
Camel	41.89%	58.10%
Cow	45.79%	54. 20%
Goat	45.32%	54.67%
Sheep	44.39%	55.60%
Donkey	44.23%	55.76%

Open in a separate window

Milks содержат более 25 различных белков. Приблизительно 82% белков молока млекопитающих составляют казеины, а остальные 18% — сывороточные белки. В этом исследовании была протестирована антипролиферативная активность различных видов молока, казеинов и сывороточных белков. Результаты показали, что кобылье, ослиное и коровье молоко и содержащиеся в них казеины обладают мощной противораковой активностью в отношении клеток MCF7. Самой высокой противораковой активностью обладает кобылий казеин, за которым следуют верблюжий, ослиный и коровий казеины. Результаты показали, что овечье и козье молоко и содержащиеся в нем казеины не обладают противораковой активностью. Эти данные свидетельствуют о том, что противораковая активность молока животных в основном связана с физическими и химическими характеристиками содержащихся в нем казеинов. Сообщалось о нескольких результатах противоопухолевой активности молока животных. Цитотоксическая активность кобылы ^, s молока против клеток Raji и CEM-SS также сообщалось ранее [18]. Сообщалось об одном исследовании цитотоксической активности пептида, полученного из казеина αs1 человека (αs1-казоморфин и амид αs1-казоморфина), в отношении клеток T47D [7]. Наши результаты показали, что сывороточные белки верблюда, коровы и осла обладают слабой цитотоксической активностью. В аналогичных исследованиях сообщалось, что ослиные и коровьи сывороточные белки обладают цитотоксической активностью в отношении A549 и клеток рака молочной железы человека [6]. В настоящем исследовании с использованием метода биоинформатики были проанализированы последовательности казеина коровы, козы, овцы, кобылы, осла и верблюда. Результаты исследования silico показали, что самый высокий процент отрицательных и положительных зарядов достигается при использовании кобыльего, верблюжьего и ослиного казеинов. Аналогичная картина была также получена для структуры альфа-спирали казеинов, поскольку казеин кобылы имел самый высокий уровень структуры альфа-спирали и сильную противораковую активность.

Это исследование показывает, что существует поразительная корреляция между противораковой активностью молочных казеинов и их физико-химическими свойствами, такими как структура альфа-спирали и положительные и отрицательные заряды. Хуанг и др. показали, что высокозаряженные производные COS (хитоолигосахаридов) могут значительно снижать жизнеспособность раковых клеток независимо от положительного или отрицательного заряда [19].]. Вторичная структура (α-спираль или β-лист) противоопухолевых пептидов связана с высоким процентом отрицательных и положительных зарядов. В нескольких исследованиях сообщалось, что альфа-спиральные катионные противоопухолевые пептиды (ACP) демонстрируют уникальные механизмы действия и несколько необычных свойств, таких как активность широкого спектра и быстрое действие, и раковые клетки не могут с ними бороться [20]. Согласно нашим результатам, молочный казеин может быть хорошим кандидатом для лечения онкологических больных in vivo.

Авторы выражают признательность Университету Исфахана за финансовую поддержку этого исследования.

Автор не имеет финансовых или нефинансовых конкурирующих интересов

1. Джаббари С., Хасани Р., Кафилзаде Ф., Джанфешан С. Антимикробные пептиды из молочных белков: проспект. Энн Биол Рез. 2012;3:5313–5318. [Google Scholar]

2. López-Expósito I, Quiros A, Amigo L, Recio I. Гидролизаты казеина как источник противомикробных, антиоксидантных и антигипертензивных пептидов. Лайт. 2007; 87: 241–249.. [Google Scholar]

3. Беллами В., Ямаути К., Вакабаяши Х., Такасе М. , Такакура Н., Шимамура С., Томита М. Противогрибковые свойства лактоферрицина В, пептида, полученного из N-концевой области бычьего лактоферрина. Lett Appl Microbiol. 1994; 18: 230–233. [Google Scholar]

4. Лахов Э., Регельсон В. Антибактериальные и иммуностимулирующие казеиновые производные молока: казецидин, исрацидиновые пептиды. Пищевая химическая токсикол. 1996; 34: 131–145. [PubMed] [Google Scholar]

5. Салами М., Мусави-Мовахеди А.А., Эхсани М.Р., Юсефи Р., Хартле Т., Чоберт Дж.М., Разави С.Х., Хенрих Р., Балалаи С., Эбади С.А., Пуртакдуст С. Улучшение противомикробного и антиоксидантная активность белков верблюжьей и бычьей сыворотки за счет ограниченного протеолиза. J Agric Food Chem. 2010;58:3297–3302. [PubMed] [Google Scholar]

6. Mao X, Gu J, Sun Y, Xu S, Zhang X, Yang H, Ren F. Антипролиферативное и противоопухолевое действие активных компонентов ослиного молока на легкое человека A549 раковые клетки. Int Dairy J. 2009; 19: 703–708. [Google Scholar]

7. Hatzoglou A, Bakogeorgou E, Hatzoglou C, Martin PM, Castanas E. Антипролиферативные и рецепторсвязывающие свойства α- и β-казоморфинов в клеточной линии рака молочной железы человека T47D. Евр Дж Фармакол. 1996; 310: 217–223. [PubMed] [Академия Google]

8. Herrouin M, Mollé D, Fauquant J, Ballestra F, Maubois JL, Léonil J. Новые генетические варианты, выявленные в белках сыворотки ослиного молока. J Protein Chem. 2000;19:105–116. [PubMed] [Google Scholar]

9. Брайан Дж. П., Закари Л. В., Сет Дж. К. Дазатиниб проявляет синергизм как с цитотоксическими ингибиторами, так и с ингибиторами сигнальной трансдукции в гетерогенных клеточных линиях рака молочной железы: уроки для разработки комбинированной таргетной терапии. Рак Летт. 2012; 320:104–110. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

10. Мосманн Т. Экспресс-колориметрический анализ клеточного роста и выживания Применение для анализа пролиферации и цитотоксичности. Дж Иммунол Методы. 1983; 65: 55–63. [PubMed] [Google Scholar]

11. Морган Д.М. Анализ тетразолия (МТТ) на клеточную жизнеспособность и активность. Полиаминовые протоколы, Humana Press, Тотова, Нью-Джерси, 1998:179–184. [Google Scholar]

12. Sievers F, Wilm A, Dineen D, Gibson TJ, Karplus K, Li W, Lopez R, McWilliam H, Remmert M, Söding J, Thompson JD. Быстрое, масштабируемое создание высококачественных множественных выравниваний белков с помощью Clustal Omega. Мол Сист Биол. 2011; 7:1–9. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

13. Гарнье Дж., Гибрат Дж. Ф., Робсон Б. Метод GOR для предсказания вторичной структуры белка по аминокислотной последовательности. Мет Энзимол. 1996; 266: 540–553. [PubMed] [Google Scholar]

14. Костантини С., Колонна Г., Факкиано А.М. Склонность аминокислот к вторичной структуре зависит от структурного класса белка. Biochem Biophys Res Commun. 2006; 342:441–451. [PubMed] [Google Scholar]

15. Лин К., Симоссис В.А., Тейлор В.Р., Херинга Дж. Простой и быстрый метод прогнозирования вторичной структуры с использованием скрытых нейронных сетей. Биоинформатика. 2005; 21: 152–159.. [PubMed] [Google Scholar]

16. Gasteiger E, Hoogland C, Gattiker A, Duvaud SE, Wilkins MR, Appel RD, Bairoch A. Инструменты идентификации и анализа белков на сервере ExPASy. Хумана Пресс; 2005. стр. 571–607. [Google Scholar]

17. Петерсен Б., Петерсен Т.Н., Андерсен П., Нильсен М., Лундегаард С. Общий метод присвоения показателей надежности, применяемый к прогнозам доступности растворителя. BMC Struct Biol. 2009; 9:51–61. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

18. Рахмат А., Росли Р., Тан М.Х., Умар-Цафе Н., Али А.М., Бакар А., Фадзелли М. Сравнительная оценка цитотоксического действия молока различных видов на лейкозные клеточные линии. Малайцы J Med Health Sci. 2006; 2:1–10. [Google Scholar]

19. Хуан Р., Мендис Э., Раджапаксе Н., Ким С.К. Сильный электронный заряд как важный фактор противораковой активности хитоолигосахаридов (COS) Life Sci. 2006; 78: 2399–2408. [PubMed] [Google Scholar]

20. Huang Y, Feng QI, Yan Q, Hao X, Chen Y.