Лаборатория «Инвитро» в 1-м квартале, Самара, п. Мехзавод, мкр. Новая Самара, квартал 1, д. 51

Лаборатории

Сеть клиник «Инвитро»

Написать отзыв

Направления

Узкая специализация: Лабораторная диагностика

Лабораторная диагностика
COVID-19
Функциональная диагностика

Еще 2

О клинике

О сети клиник «Инвитро»

Услуги

Аллергопробы, Анализ на C-реактивный белок, Анализы для госпитализации, Анализы на дому, Аутоиммунные исследования, Бактериологические исследования, Бактериологические исследования. Посев грудного молока на микрофлору, Бактериологические исследования. Энтеробиоз, Биохимические исследования, Биохимические исследования. АЛТ, Биохимические исследования. Анализ крови на глюкозу, Биохимические исследования. АСТ, Биохимические исследования. Белок, Биохимические исследования. Билирубин, Биохимические исследования. Витамин А, Биохимические исследования. Витамин Е, Биохимические исследования. Витамины группы B, Биохимические исследования. Витамины Д, Биохимические исследования. Калий, натрий, хлор, Биохимические исследования. Кальций, Биохимические исследования. Кальций ионизированный, Биохимические исследования. Креатинин, Биохимические исследования. Липидограмма, Биохимические исследования. Магний, Биохимические исследования. Мочевина, Биохимические исследования. Общий холестерин, Биохимические исследования. Сывороточное железо, Биохимические исследования. Трансферрин, Биохимические исследования. Ферритин, Биохимические исследования. Цинк, Взятие крови из пальца, Взятие крови из периферической вены, Взятие урологического материала, Второе мнение, Генетическая диагностика, Генетическая диагностика. ДНК-тест, Гистологические исследования, Гормональные исследования, Гормональные исследования. T3 свободный, Гормональные исследования. АКТГ, Гормональные исследования. АТ ТПО (антитела к тиреопероксидазе), Гормональные исследования. Инсулин, Гормональные исследования. Кортизол, Гормональные исследования. ЛГ (лютеинизирующий гормон), Гормональные исследования. Паратгормон, Гормональные исследования. Прогестерон, Гормональные исследования. Пролактин, Гормональные исследования. Соматотропный гормон, Гормональные исследования. Т4 свободный, Гормональные исследования. Тестостерон, Гормональные исследования. ТТГ (тиреотропный гормон), Гормональные исследования. ФСГ (фолликулостимулирующий гормон), Гормональные исследования. ХГЧ, Гормональные исследования. Эстрадиол, Гормональный профиль (женский), Иммунологические исследования, Иммунологические (серологические) исследования. Антитела к бледной трепонеме, Иммунологические (серологические) исследования. Антитела к вирусу иммунодефицита человека, Иммунологические (серологические) исследования. Антитела к гепатиту B и C, Исследование кала на скрытую кровь, Коагулограмма. Анализ на D-Димер, Количественный анализ на наличие антител IgG к коронавирусу COVID-19, Количественный анализ на наличие антител IgM к коронавирусу COVID-19, Кольпоскопия, Микроскопическое исследование кала на простейшие, Микроскопическое исследование кала на яйца и личинки гельминтов, Микроскопическое исследование ногтевых пластинок на грибы (дрожжевые, плесневые, дерматомицеты), Общеклинические исследования, Общеклинические исследования мочи. Исследование мочи методом Нечипоренко, Общеклинические исследования мочи. Определение белка в моче (количественный), Общий анализ крови, Общий анализ мочи, Онкомаркеры, Онкомаркеры. HE4, Онкомаркеры. ROMA, Онкомаркеры. АФП, Онкомаркеры. Бета-2-микроглобулин, Онкомаркеры. Нейронспецифическая енолаза, Онкомаркеры. ПСА, Онкомаркеры. Раковый антиген СА 19-9, Онкомаркеры. РЭА, Онкомаркеры. СА 125, Онкомаркеры. СА 15-3, Онкомаркеры. СА-242, Онкомаркеры. Хромогранин А, Определение группы крови и резус-фактора, ПЦР-диагностика, Соскоб кожи на грибы (дрожжевые, плесневые, дерматомицеты), Соскоб кожи на клещей, Тест на COVID-19, Цитологические исследования, Электрокардиография (ЭКГ)

Похожие клиники

Многопрофильные медицинские центры взрослые

Медцентр лазерного лечения «НаноМед» на Вилоновской

Самара

Многопрофильные медицинские центры взрослые, Многопрофильные медицинские центры детские

Медицинский центр «Радуга» на Республиканской

Самара

Многопрофильные медицинские центры взрослые, Многопрофильные медицинские центры детские

Медицинский центр «Радуга» на Ново-Садовой

Самара

таблетки диспергируемые, 500 мг — Энциклопедия лекарств РЛС

Полусинтетическое антибактериальное ЛС, аналог ампициллина, обладающий широким спектром бактерицидной активности в отношении многих грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов. Молекулярная масса 419,45 Да.

Фармакодинамика

Механизм действия

Амоксициллин сходен с пенициллином по своему бактерицидному действию в отношении чувствительных бактерий на стадии активного размножения. Он действует путем ингибирования биосинтеза клеточной стенки, что приводит к гибели бактерий.

Механизм резистентности

Резистентность к амоксициллину опосредуется главным образом бета-лактамазами, которые расщепляют бета-лактамное кольцо амоксициллина, делая его неактивным.

Амоксициллин проявляет активность в отношении большинства изолятов бактерий, перечисленных ниже, как in vitro»>in vitro, так и при инфекциях с выраженными клиническими симптомами.

Грамположительные микроорганизмы: Enterococcus faecalis, Staphylococcus spp., Streptococcus pneumoniae, Streptococcus spp. (альфа- и бета-гемолитические изоляты).

Грамотрицательные микроорганизмы: Escherichia coli, Haemophilus influenzae, Helicobacter pylori, Proteus mirabilis.

Методы определения чувствительности микроорганизмов

По возможности лаборатории клинической микробиологии должны предоставлять врачам результаты тестов in vitro»>in vitro на чувствительность к антибактериальным ЛС, используемым в медицинских учреждениях, в виде периодических отчетов, описывающих профиль чувствительности внутрибольничных (нозокомиальных) и внебольничных патогенных микроорганизмов, для правильного подбора антибактериальных ЛС при лечении.

Методы разведения. Для определения МПК противомикробных ЛС используются количественные методы. Показатель МПК дает оценку чувствительности бактерий к противомикробным соединениям. МПК следует определять с использованием стандартизированного метода исследования (разведения в бульоне или агаре). Значения МПК следует интерпретировать в соответствии с критериями, приведенными в таблице 1.

Диффузионные методы. Количественные методы, требующие измерения диаметра зоны, также дают предварительную оценку чувствительности бактерий к противомикробным соединениям. Размер зоны следует определять с использованием стандартизированного метода исследования.

Чувствительность к амоксициллину Enterococcus spp., Enterobacteriaceae и H.influenzae может быть определена путем тестирования ампициллина. Чувствительность к амоксициллину Staphylococcus spp. и бета-гемолитических Streptococcus spp. может быть определена путем тестирования пенициллина. Большинство изолятов Enterococcus spp., устойчивых к ампициллину или амоксициллину, продуцируют бета-лактамазу типа Temoneira (TEM). Тест на бета-лактамазу является быстрым способом определения резистентности к ампициллину и амоксициллину.

Чувствительность к амоксициллину Streptococcus pneumoniae (изоляты, не вызывающие менингит) может быть определена путем тестирования пенициллина или оксациллина. Критерии интерпретации чувствительности S.pneumoniae к амоксициллину представлены в таблице 1.

Таблица 1

Критерии интерпретации теста на чувствительность для амоксициллина

Патогенный микроорганизм	МПК, мкг/мл			Диаметр зоны по диско-диффузионному методу, мм
	Чувствительные	Умеренно чувствительные	Резистентные	Чувствительные	Умеренно чувствительные	Резистентные
S. pneumoniae (изоляты, не вызывающие менингит)1	≤2	4	≥8	–	–	–

¹S.pneumoniae следует тестировать с использованием диска, пропитанного 1 мкг оксациллина. Изоляты с размером зоны оксациллина ≥20 мм считаются чувствительными к амоксициллину. МПК амоксициллина следует определять на изолятах S.pneumoniae с размерами зоны оксациллина ≤19 мм.

Результат «Чувствительный» означает, что противомикробное ЛС, вероятно, будет подавлять рост возбудителя, если достигнет необходимой для этого концентрации в очаге инфекции.

Результат «Умеренно чувствительный» указывает на неоднозначность, и если микроорганизм не обладает чувствительностью к альтернативным, клинически приемлемым ЛС, тест следует повторить. Данная категория подразумевает возможность клинического применения в тех органах и тканях организма, где ЛС физиологически сконцентрировано. Данная категория также обеспечивает буферную зону, которая предотвращает возникновение серьезных расхождений в интерпретации из-за небольших неконтролируемых технических факторов.

Результат «Резистентный» указывает на то, что противомикробное ЛС вряд ли будет подавлять рост возбудителя (патогенного микроорганизма) при достижении концентрации, обычно наблюдаемой в очаге инфекции, и следует выбрать другую терапию.

Тестирование на чувствительность к H.pylori

Методы тестирования чувствительности к амоксициллину in vitro»>in vitro для определения МПК и размеров зон не были стандартизированы, валидированы или одобрены для тестирования H.pylori. Пробы на H.pylori и результаты теста на чувствительность к кларитромицину должны быть получены на изолятах от пациентов, у которых тройная терапия оказалась неэффективной. Если обнаружена резистентность к кларитромицину, следует использовать режим, не содержащий кларитромицин.

Контроль качества

Стандартизированные методы тестирования на чувствительность требуют использования средств лабораторного контроля, а также достаточного опыта и квалификации сотрудника, выполняющего тест, для мониторинга и обеспечения правильности и прецизионности измерений. Стандартный порошок амоксициллина должен обеспечивать диапазон значений МПК, указанный в таблице 2.

Таблица 2

Допустимые диапазоны контроля качества для амоксициллина¹

¹ Пределы контроля качества при тестировании чувствительности E.Coli 35218 на гемофильной тест-среде (Haemophilus Test Medium, HTM) составляют ≥256 мкг/мл для амоксициллина; тестирование может помочь определить, сохранил ли изолят способность продуцировать бета-лактамазу.

Фармакокинетика

Абсорбция

После перорального приема амоксициллин быстро абсорбируется, не разрушается в кислой среде желудка. Влияние приема пищи на всасывание амоксициллина недостаточно изучено, применение амоксициллина в дозах 400 и 875 мг было изучено только в начале легкого приема пищи.

Пероральное применение амоксициллина в форме капсул в дозах 250 и 500 мг приводит к среднему значению max»>C_max в плазме крови через 1–2 ч после приема в диапазоне от 3,5 до 5 и 5,5 до 7,5 мкг/мл соответственно.

Средние фармакокинетические параметры амоксициллина после перорального приема в форме таблеток в дозе 875 мг, полученные в ходе открытого двухэтапного перекрестного исследования биоэквивалентности однократной дозы у 27 взрослых пациентов, в котором сравнивали применение амоксициллина в дозе 875 мг и комбинации амоксициллин + клавулановая кислота в дозе 875 мг, составляли: AUC_0–∞ — (35,4± 8,1) мкг·ч/мл, max»>C_max — (13,8±4,1) мкг/мл. Принятие дозы осуществлялось в начале легкого приема пищи после воздержания от приема пищи в течение ночи.

Прием амоксициллина в виде суспензии для перорального приема в дозах 125 и 250 мг/5 мл приводит к среднему max»>C_max в плазме крови через 1–2 ч после приема в диапазоне от 1,5 до 3 и от 3,5 до 5 мкг/мл соответственно.

Пероральное применение однократных доз амоксициллина в форме жевательных таблеток в дозе 400 мг и суспензии для приема внутрь в дозе 400 мг/5 мл у 24 взрослых добровольцев дало сопоставимые фармакокинетические показатели (таблица 3).

Таблица 3

Средние фармакокинетические параметры амоксициллина в форме жевательных таблеток (400 мг) и суспензии для перорального приема (400 мг/5 мл) у здоровых взрослых добровольцев (± стандартное отклонение)

¹ Средние значения у 24 здоровых добровольцев. max»>T_max примерно 1 ч после приема.

Распределение

Амоксициллин легко проникает в большинство тканей и жидкостей организма, за исключением головного мозга и спинномозговой жидкости, кроме случаев воспаления оболочек головного мозга. В сыворотке крови амоксициллин примерно на 20% связан с белками. После введения амоксициллина в дозе 1 г с помощью специальной технологии кожного отверстия для количественного определения уровня антибиотика амоксициллин в терапевтических концентрациях был обнаружен в интерстициальной жидкости.

Метаболизм и выведение

T_1/2 амоксициллина составляет 61,3 мин. Примерно 60% перорально принятой дозы амоксициллина выводится с мочой в течение 6–8 ч. Определяемые концентрации в сыворотке крови наблюдаются до 8 ч после перорального приема дозы амоксициллина. Поскольку бóльшая часть введенной дозы амоксициллина выводится с мочой в неизмененном виде, его выведение может быть замедлено при одновременном применении пробенецида (см. «Взаимодействие»).

Канцерогенность, мутагенность, влияние на фертильность

Долгосрочные исследования на животных для оценки канцерогенного потенциала не проводились.

Исследования по выявлению мутагенного потенциала амоксициллина в качестве моновещества (только амоксициллин) не проводились, тем не менее имеется информация, полученная в результате исследований комбинации амоксициллин + клавулановая кислота в соотношении 4:1. Данная комбинация не продемонстрировала признаков мутагенности в тесте на бактериальную мутацию Эймса и на генную конверсию дрожжей. Комбинация амоксициллин + клавулановая кислота была слабо положительной в тесте на клетках лимфомы мышей, но тенденция к увеличению частоты мутаций в этом тесте наблюдалась при дозах, которые также были связаны со снижением выживаемости клеток. Она была отрицательной в микроядерном тесте на мышах и в методе доминантных леталей на мышах. Клавулановая кислота (в виде соли калия) в качестве моновещества (только клавуланат калия) продемонстрировал отрицательный результат в тесте на бактериальную мутацию Эймса и в микроядерном тесте на мышах.

В исследовании репродуктивной функции нескольких поколений крыс не наблюдалось нарушения фертильности или других неблагоприятных эффектов со стороны репродуктивной функции при дозах до 500 мг/кг (примерно в 2 раза выше дозы 3 г для человека в пересчете на площадь поверхности тела).

Клинические исследования

Эрадикация H. pylori для снижения риска рецидива язвы двенадцатиперстной кишки

В рандомизированных двойных слепых клинических исследованиях, проведенных в США с участием пациентов с H.pylori и язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки (определяемой как активная язва или язва двенадцатиперстной кишки в анамнезе в течение 1 года), оценивали эффективность применения лансопразола в комбинации с амоксициллином (в форме капсул) и кларитромицином (в форме таблеток) в качестве тройной терапии продолжительностью 14 дней или в комбинации с амоксициллином (в форме капсул) в качестве двойной терапии продолжительностью 14 дней для эрадикации H.pylori. На основании результатов данных исследований были установлены безопасность и эффективность двух различных схем эрадикации.

Тройная терапия. Амоксициллин в дозе 1 г 2 раза в день + кларитромицин в дозе 500 мг 2 раза в день + лансопразол в дозе 30 мг 2 раза в день (таблица 4).

Двойная терапия. Амоксициллин в дозе 1 г 3 раза в день + лансопразол в дозе 30 мг 3 раза в день (таблица 5).

Продолжительность курсов лечения составляла 14 дней. Эрадикация H.pylori определялась как 2 отрицательных теста (посев и гистология) через 4–6 нед после окончания лечения. Было показано, что тройная терапия более эффективна, чем все возможные комбинации двойной терапии, и что двойная терапия более эффективна, чем обе монотерапии. Было показано, что эрадикация H.pylori снижает риск рецидива язвы двенадцатиперстной кишки.

Таблица 4

Показатели эрадикации H.pylori при применении амоксициллина в составе режима тройной терапии

¹ Анализ проводили на основе данных пациентов, поддающихся оценке, с подтвержденной язвой двенадцатиперстной кишки (активной или в анамнезе в течение 1 года) и инфекцией H. pylori на исходном уровне, определяемой как минимум двумя положительными результатами из 3 эндоскопических тестов CLOtest, гистологии и/или посева. Пациентов включали в анализ, если они завершили исследование. Кроме того, если пациенты выбывали из исследования из-за развития нежелательной реакции, связанной с исследуемым ЛС, они включались в анализ как не прошедшие терапию.

² Пациентов включали в анализ, если у них была подтверждена инфекция H.pylori на исходном уровне, как определено выше, и была подтверждена язва двенадцатиперстной кишки (активная или в анамнезе в течение 1 года). Все выбывшие из исследования были включены как не прошедшие терапию.

Таблица 5

Показатели эрадикации H.pylori при применении амоксициллина в составе режима двойной терапии

¹Анализ проводился на основе данных пациентов, поддающихся оценке, с подтвержденной язвой двенадцатиперстной кишки (активной или в анамнезе в течение 1 года) и инфекцией H. pylori на исходном уровне, определяемой как минимум двумя положительными результатами из 3 эндоскопических тестов CLOtest, гистологии и/или посева. Пациентов включали в анализ, если они завершили исследование. Кроме того, если пациенты выбывали из исследования из-за развития нежелательной реакции, связанной с исследуемым ЛС, они включались в анализ как не прошедшие терапию.

² Пациентов включали в анализ, если у них была подтверждена инфекция H.pylori на исходном уровне, как определено выше, и была подтверждена язва двенадцатиперстной кишки (активная или в анамнезе в течение 1 года). Все выбывшие из исследования были включены как не прошедшие терапию.

Инфекции ЛОР-органов (уха, носа и горла), вызванные чувствительными (только бета-лактамазотрицательные) изолятами Streptococcus species (только альфа- и бета-гемолитические изоляты), Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus spp. или Haemophilus influenzae; инфекции мочеполового тракта, вызванные чувствительными (только бета-лактамазотрицательные) изолятами Escherichia coli, Proteus mirabilis или Enterococcus faecalis; инфекции кожи и подкожной клетчатки, вызванные чувствительными (только бета-лактамазотрицательные) изолятами Streptococcus spp. (только альфа- и бета-гемолитические изоляты), Staphylococcus spp. или E.Coli; инфекции нижних дыхательных путей, вызванные чувствительными (только бета-лактамазотрицательные) изолятами Streptococcus spp. (только альфа- и бета-гемолитические изоляты), S. pneumoniae, Staphylococcus spp. или H.Influenzae; инфекции H.pylori (в виде тройной терапии с использованием кларитромицина и лансопразола или двойной терапии с использованием лансопразола у пациентов с инфекцией H.pylori и язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки (активная язва или язва двенадцатиперстной кишки в анамнезе в течение 1 года) с диагностированной аллергией или непереносимостью кларитромицина, или у которых диагностирована или подозревается резистентность к кларитромицину).

Серьезная реакция гиперчувствительности (например, анафилаксия или синдром Стивенса-Джонсона) на амоксициллин или другие бета-лактамные антибактериальные ЛС (например, пенициллины и цефалоспорины).

Данные клинических исследований

Наиболее частыми побочными реакциями (>1%), наблюдавшимися в клинических исследованиях амоксициллина (в форме капсул, таблеток или в виде суспензии для перорального приема), были диарея, кожная сыпь, рвота и тошнота.

Тройная терапия. Наиболее частыми побочными реакциями у пациентов, получавших тройную терапию (амоксициллин + кларитромицин + лансопразол), были диарея (7%), головная боль (6%) и извращение вкуса (5%).

Двойная терапия. Наиболее частыми побочными реакциями у пациентов, получавших двойную терапию амоксициллин + лансопразол, были диарея (8%) и головная боль (7%).

Более подробную информацию о побочных реакциях при применении кларитромицина или лансопразола следует смотреть в инструкциях по их медицинскому применению.

Данные пострегистрационных наблюдений

В дополнение к побочным реакциям, о которых сообщалось в ходе клинических исследований, в период пострегистрационного применения пенициллинов были выявлены следующие нежелательные реакции. Поскольку данные об этих реакциях были получены из спонтанных сообщений от популяции неопределенного размера, невозможно достоверно оценить их частоту возникновения или установить причинно-следственную связь с воздействием амоксициллина. Данные побочные реакции были включены в список из-за сочетания их серьезности, частоты сообщений или потенциальной причинно-следственной связи с применением амоксициллина.

Инфекции и инвазии: кожно-слизистый кандидоз.

Со стороны ЖКТ: черный «волосатый» язык, геморрагический/псевдомембранозный колит. Симптомы псевдомембранозного колита могут появиться во время или после антибактериальной терапии (см. «Меры предосторожности»).

Реакции гиперчувствительности: анафилаксия (см. «Меры предосторожности»). Сообщалось о таких реакциях, как сывороточноподобный синдром, эритематозная макулопапулезная сыпь, многоформная эритема, синдром Стивенса-Джонсона, эксфолиативный дерматит, токсический эпидермальный некролиз, острый генерализованный экзантематозный пустулез, гиперчувствительный васкулит и крапивница.

Со стороны печени: умеренное повышение уровня АСТ и/или АЛТ, но значимость этого явления неизвестна. Сообщалось о нарушениях функции печени, включая холестатическую желтуху, печеночный холестаз и острый цитолитический гепатит.

Со стороны почек: кристаллурия (см. «Передозировка»).

Со стороны крови и лимфатической системы: анемия, включая гемолитическую, тромбоцитопения, тромбоцитопеническая пурпура, эозинофилия, лейкопения и агранулоцитоз. Данные нежелательные реакции обычно обратимы после прекращения терапии и считаются явлениями гиперчувствительности.

Со стороны ЦНС: обратимая гиперактивность, возбуждение, беспокойство, бессонница, спутанность сознания, судороги, изменения поведения и/или головокружение.

Прочее: изменение цвета зубов (коричневое, желтое или серое окрашивание). Большинство сообщений касалось педиатрических пациентов. В большинстве случаев изменение цвета уменьшалось или полностью устранялось с помощью обычной или профессиональной чистки зубов.

Перорально, режим дозирования и продолжительность лечения устанавливаются врачом, в зависимости от показания, возраста и состояния пациента.

Анафилактические реакции

Сообщалось о возникновении серьезных и иногда жизнеугрожающих реакций гиперчувствительности у пациентов, принимающих пенициллины, включая амоксициллин. Хотя анафилаксия чаще возникает после парентеральной терапии, она наблюдалась и у пациентов, принимающих пероральные пенициллины. Эти реакции чаще наблюдаются у пациентов с гиперчувствительностью к пенициллину и/или чувствительностью к нескольким аллергенам в анамнезе. Имеются сообщения о пациентах с гиперчувствительностью к пенициллину в анамнезе, у которых наблюдались тяжелые реакции при лечении цефалоспоринами. Перед началом терапии амоксициллином следует тщательно выяснить наличие в анамнезе реакций гиперчувствительности на пенициллины, цефалоспорины или другие аллергены.

Диарея, ассоциированная с C.difficile

Диарея, ассоциированная с C.difficile, наблюдается при применении почти всех противомикробных ЛС, включая амоксициллин, а ее степень тяжести может варьировать от легкой диареи до жизнеугрожающего колита. Применение противомикробных ЛС нарушает нормальную флору толстой кишки, что приводит к чрезмерному росту C.difficile.

C.difficile вырабатывает токсины A и B, которые способствуют развитию ассоциированной с ней диареи (CDAD). Штаммы C.difficile, продуцирующие очень высокий уровень токсинов, вызывают повышенную заболеваемость и смертность, поскольку эти инфекции могут быть рефрактерны к антибактериальной терапии и потребовать колэктомии. Возможность развития CDAD необходимо рассматривать у всех пациентов, у которых на фоне приема антибактериальных ЛС развивается диарея. Необходимо тщательно собирать анамнез, поскольку, по имеющимся данным, CDAD может возникнуть и через 2 мес после приема противомикробных ЛС.

При подозрении на CDAD или ее подтверждении может потребоваться прекращение применения противомикробных ЛС, неактивных против C.difficile. В соответствии с клиническими показаниями следует контролировать объем жидкости и электролитов, проводить белкую диету, лечение противомикробными ЛС, активными в отношении C.difficile, и хирургическое обследование.

Риск развития лекарственно-резистентных микроорганизмов

Применение амоксициллина при отсутствии доказанной или с высокой вероятностью предполагаемой бактериальной инфекции или профилактических показаний может не принести пользы пациенту и повысить риск развития лекарственнорезистентных микроорганизмов.

Для снижения риска развития лекарственнорезистентных микроорганизмов и сохранения эффективности амоксициллина и других антибактериальных ЛС амоксициллин следует применять только для лечения или профилактики тех инфекций, которые вызваны или предположительно вызваны чувствительными бактериями. При наличии информации о культуре и чувствительности микроорганизмов следует учитывать ее при выборе или коррекции антибактериальной терапии. При отсутствии такой информации эмпирическому выбору терапии могут способствовать местные эпидемиологические данные и данные об особенностях чувствительности.

Применение у пациентов с мононуклеозом

У высокой доли пациентов с мононуклеозом, получающих амоксициллин, развивается эритематозная кожная сыпь. Амоксициллин не следует назначать пациентам с мононуклеозом.

Фенилкетонурия

ЛС на основе амоксициллина в качестве вспомогательного вещества могут содержать или не содержат фенилаланин и, следовательно, не могут или могут применяться у пациентов с фенилкетонурией.

Особые группы пациентов

Дети. Из-за неполного развития функции почек у новорожденных и детей первого полугодия жизни выведение амоксициллина может быть замедлено. Следует корректировать дозировку амоксициллина у детей в возрасте 12 нед или младше (≤3 мес).

Пожилой возраст. Был проведен анализ результатов клинических исследований амоксициллина для выявления различий в ответах на терапию у пациентов в возрасте 65 лет и старше и более молодых пациентов. Данный анализ не выявил различий между пожилыми и более молодыми пациентами, однако нельзя исключить более высокую чувствительность некоторых пожилых пациентов.

Поскольку амоксициллин в значительной степени выводится почками, риск развития побочных реакций может быть выше у пациентов с нарушением функции почек. Поскольку пациенты пожилого возраста имеют более высокую вероятность снижения функции почек, следует соблюдать осторожность при подборе дозы и контролировать функцию почек.

Почечная недостаточность. Амоксициллин выводится преимущественно почками, поэтому пациентам с тяжелыми нарушениями функции почек (СКФ <30 мл/мин) требуется коррекция дозы.

Грудное молоко и слюна младенцев формируют микробиом ротовой полости — ScienceDaily

Исследование, проведенное доктором Эммой Суини и адъюнкт-профессором Кристин Нокс из Института здоровья и биомедицинских инноваций QUT совместно с коллегами из Университета Квинсленда, показало, что рост Некоторые микробы ингибировались на срок до 24 часов после смешивания грудного молока и слюны.

Доктор Суини сказал, что более ранние исследования группы выявили значительные различия в распространенности ключевых бактерий во рту у детей, находящихся на грудном вскармливании и на искусственном вскармливании, и что взаимодействие грудного молока и слюны повышает врожденный иммунитет, действуя синергетически для регулирования микробиома полости рта новорожденных. .

«Наши результаты показывают, что грудное молоко — это больше, чем просто источник питания для младенцев, потому что оно играет важную роль в формировании здорового микробиома полости рта», — сказал доктор Суини.

«Наше предыдущее исследование показало, что взаимодействие неонатальной слюны и грудного молока высвобождает антибактериальные соединения, в том числе перекись водорода.

«Грудное молоко содержит большое количество фермента под названием ксантиноксидаза, который действует на два субстрата, обнаруженных в детской слюне.

«Высвобождение перекиси водорода в результате этого взаимодействия также активирует «систему лактопероксидазы», ​​которая производит дополнительные соединения, которые также обладают антибактериальной активностью, и эти соединения способны регулировать рост микроорганизмов.

реклама

«В этом исследовании мы подвергли воздействию различных микроорганизмов смесь грудного молока и слюны и обнаружили, что рост этих микроорганизмов подавлялся немедленно и на срок до 24 часов, независимо от того, считался ли микроорганизм опасным. быть «патогенным» (вредным) или «комменсальным» (обычно обнаруживаемым) во рту младенца».

Доктор Суини сказал, что состав микробиоты полости рта новорожденных является важным фактором здоровья и благополучия.

«Изменения в этих бактериальных сообществах у новорожденных имеют важные последствия для инфекции или заболевания в раннем возрасте», — сказала она.

«В то время как микробиота полости рта взрослых стабильна, наши исследования показали, что микробиота во рту новорожденных гораздо более динамична и, по-видимому, изменяется в зависимости от режима кормления в течение первых нескольких месяцев жизни», — сказала она.

«Было показано, что сочетание грудного молока и слюны играет важную роль в формировании здоровой микробиоты полости рта в течение первых нескольких месяцев жизни, но это также имеет серьезные последствия для недоношенных или больных детей, которых кормят через зонд.

«В этих случаях смешивания грудного молока и детской слюны не происходит, поэтому они не получают преимуществ антибактериальных соединений, выделяемых во время грудного вскармливания.

«Другие исследователи показали, что перекись водорода может оставаться активной при уровне pH аналогична таковой в желудке ребенка, поэтому мы думаем, что эта антимикробная активность, наблюдаемая во рту, может также продолжаться в желудке и кишечнике ребенка.

История Источник:

Материалы предоставлены Технологический университет Квинсленда . Примечание. Содержимое можно редактировать по стилю и длине.

Разработка модели клеточной культуры in vitro для изучения соотношения терапевтических препаратов в молоке и плазме Академическая научно-исследовательская работа по теме «Клиническая медицина»

Научная статья

терапевтические препараты

Майтхили А. Атхавале, Анурупа Майтра, Шахназ Патель, Виджай Р. Бхате1, Вилли С. Тоддивалла

Национальный институт исследований репродуктивного здоровья (ICMR), Мумбаи, Analytical Solutions, Нави Мумбаи, Индия

Д-р Анурупа Майтра, электронная почта: [email protected]

РЕФЕРАТ

Цель: создать модель клеточной культуры in vitro для прогнозирования M/P (концентрация лекарственного средства в молоке/концентрация в материнской плазме). ) соотношения терапевтических препаратов, т.е. рифампицин, теофиллин, парацетамол и аспирин.

Материалы и методы. Модель культуры клеток in vitro с использованием клеток CIT3 (эпителиальных клеток молочной железы мыши) создавали путем культивирования клеток в трансвеллах. Клетки образовали цельный монослой, обеспечивающий только трансклеточный транспорт, как это происходит in vivo. Функциональность клеток была подтверждена с помощью сканирующей электронной микроскопии. Изучали перенос исследуемых препаратов из плазмы в молоко по времени и сравнивали с фактическими (in vivo) отношениями M/P, полученными при заявленном tmax для соответствующих препаратов.

Результаты: Разработанная модель имитировала два важных внутренних фактора эпителиальных клеток молочной железы, а именно. секреторные и контактные свойства, а также пассивный путь транспорта лекарств. Отношения M/P in vitro при указанном tmax составляли 0,23, 0,61, 0,87 и 0,03 соответственно для рифампицина, теофиллина, парацетамола и салициловой кислоты по сравнению с 0,29, 0,65, 0,65 и 0,22 соответственно in vitro.

Вывод: Наши предварительные усилия по разработке физиологической модели in vitro дали многообещающие результаты. Скорость переноса лекарств с использованием разработанной модели хорошо сравнима с потенциалом переноса, наблюдаемым in vivo, за исключением салициловой кислоты, которая переносилась in vitro в гораздо более низкой концентрации. Модель может быть разработана в качестве неинвазивной альтернативы методу in vitro для определения переноса терапевтических препаратов в грудное молоко.

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Клеточная культура, соотношение молока и плазмы, клетки CIT3, in vitro, соотношение M/P, обращенно-фазовая высокоэффективная жидкостная хроматография

Введение

Хорошо известно, что почти все лекарственные грудное молоко в «фармакологически активной» форме11,21, тем самым подвергая ребенка воздействию этих фармакологически активных препаратов. Это воздействие может быть потенциально опасным, поскольку оно происходит во время фазы быстрого роста и развития детеныша, когда его системы метаболизма лекарственных средств и выделительная система еще незрелы. Один из способов

свести к минимуму воздействие этих материнских лекарств на младенца, значит знать количество каждого лекарства, попадающего в молоко.

Способность лекарственного средства проникать в молоко выражается его соотношением M/P, т. е. концентрация лекарственного средства в грудном молоке/его концентрация в материнской плазме. Проведение исследований in vivo со всеми обычно используемыми терапевтическими препаратами, без сомнения, чрезвычайно сложно, поскольку оно включает ряд последовательных образцов плазмы и молока от больных кормящих матерей, принимающих эти препараты. Чтобы обойти трудности, связанные с проведением крупномасштабных исследований in vivo для получения соотношений M/P лекарств, многие фармакологи предложили различные математические уравнения и модели in vitro для прогнозирования этих соотношений.

Математические уравнения13-71 и модель in vitro181 доступны в литературе для прогнозирования соотношения M/P лекарств. Большинство из этих предложенных уравнений/моделей громоздки в использовании из-за трудностей, связанных с получением определенных переменных для замены в уравнении. Даже после

Доступ к этой статье в Интернете

Веб-сайт: www.ijp-online.com Код быстрого ответа: B|jg

DOI: 10.4103/0253-7613.114994

обременительное упражнение, полученные отношения M/P не всегда хорошо сравнимы с фактическими соотношениями in vivo.19«111

Переход лекарства из материнской плазмы в грудное молоко in vivo зависит не только от физико-химических характеристик лекарства, как это рассматривалось в более ранних уравнениях/моделях, но также и от ряда физиологических факторов. В 2003 г. Gerk et al. al.,1121 использовали клетки CIT3 (эпителиальные клетки молочной железы мыши) для создания модели M / P in vitro с использованием защелкивающихся колодцев для изучения транспорта лекарств. В этой статье мы представили вариант этой модели. В документе описывается разработка и проверка новой модели in vitro с учетом некоторых физиологических факторов.

Чтобы создать модель in vitro для прогнозирования соотношения M/P, мы использовали клетки CIT3, которые могли имитировать два внутренних фактора эпителиальных клеток молочной железы, т. е. секрецию молока и свойство плотных контактов. Модель была дополнительно проверена путем сравнения отношений M/P наших исследуемых препаратов, полученных с помощью модели, с отношениями, полученными в наших исследованиях in vivo, полученных при t каждого

препарата. Были выбраны четыре из обычно назначаемых исследуемых препаратов, а именно рифампицин, теофиллин, парацетамол и аспирин. Выбор был основан на их различных терапевтических требованиях, фармакологических свойствах и физико-химических характеристиках.

Материалы и методы

Исследование in vivo

Исследование было одобрено комитетом по этике Национального института исследований в области репродуктивного здоровья (бывший Институт исследований в области репродукции). Информированное согласие было получено на местном языке от всех участников, которые вызвались участвовать в исследовании. Исследуемые препараты

Рифампицин, теофиллин, парацетамол и аспирин. Субъекты исследования

Все испытуемые были кормящими женщинами в возрасте 20-30 лет, весом от 40 до 50 кг. Их дети были в возрасте от 1 до 5 месяцев, и все они находились на исключительно грудном вскармливании. Субъекты были разделены на четыре группы в соответствии с исследуемым препаратом, и для каждого препарата было исследовано 15 субъектов. Группа I

Состоит из матерей, больных туберкулезом. Они получали ежедневную терапию рифампицином 450 мг + изониазидом 300 мг (Lupin Ltd.), прописанную в течение 9 месяцев. Пятеро из них начали лечение во время беременности, а остальные 10 — после родов. Группа II

Состояла из матерей, которые страдали хронической астмой и, следовательно, принимали ежедневную однократную дозу теофиллина 100 мг + сальбутамол 2 мг (аиромол таб, Zydus Ltd.) в соответствии с рекомендациями своего врача.

Группа III

Состоит из здоровых матерей, не принимающих никаких лекарств. Они вызвались принять разовую дозу парацетамола 500 мг (Glaxo Smithkline Ltd.) исключительно для исследования. IV группа

Также состояла из здоровых матерей, не нуждавшихся в медикаментозном лечении. Они также, как и матери в группе III, добровольно вызвались

принять разовую дозу аспирина (ацетилсалициловая кислота, Bayer Ltd.) 600 мг (2 таблетки по 300 мг) исключительно для исследования.

Субъекты из групп III и IV согласились принимать парацетамол/аспирин, так как они продаются без рецепта и часто принимают их внутрь при легких заболеваниях.

График отбора проб

Перед приемом препарата исходные образцы крови и молока были взяты у субъектов в группах I и II, так как они получали ежедневный режим приема рифампицина или теофиллина. Для исследования применялась единая схема сбора образцов материнской крови и молока для всех испытуемых в четырех исследуемых группах.

На матерей было внушено хорошо кормить своих младенцев грудью непосредственно перед приемом исследуемого препарата, поскольку нельзя было кормить до тех пор, пока не будет завершен сбор проб крови и грудного молока. Интервал времени между приемом лекарственного препарата матерью и взятием образца был зафиксирован в соответствии с сообщенным t из

исследуемые препараты в плазме.

Образцы материнской крови и грудного молока были собраны через два с половиной часа после приема рифампицина,1131 через 2 часа после приема теофиллина,1141 через 1 час после приема парацетамола и через полтора часа после приема аспирина матерями.1151 Затем им было рекомендовано кормить своих детей грудью. . После того, как младенцы были полностью накормлены обеими грудями, отбирали еще одну пробу молока, т.е. пробу заднего молока. Образцы переднего и заднего молока смешивали в равных количествах и немедленно брали на анализ. Поскольку рифампицин фоточувствителен, образцы, содержащие это лекарство, сразу же защищали от света. Разработка модели клеточной культуры in vitro Культура клеток CIT3 9Клетки 0003

CIT3 (PN 9, подарок проф. Маргарет Невилл, Денвер, США) расщепляли путем трипсинизации. Затем отделившиеся клетки осторожно удаляли и нейтрализовали питательной средой CIT3. Питательная среда, состоящая из модифицированной Дульбекко среды Игла (DMEM) с Ham’s 12 (50:50), дополненной 2% инактивированной нагреванием фетальной телячьей сыворотки (FBS), 5 нг/мл эпидермального фактора роста (EGF), 10 мкг/мл инсулина. , 100 ЕД/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина.

Посев клеток CIT3 на трансвелл

Суспензию клеток после трипсинизации высевали на трансвеллы (Corning Costar, диаметр мембраны 24 мм, площадь поверхности роста 4,7 см2, размер пор 0,4 мкм). Для поддержания равновесия гидростатического давления из двух камер трансвелла добавляли 1,5 мл среды в фильтрующую вставку и 2,5 мл в лунку. Затем планшеты инкубировали при 37°C, 5% CO2 в течение 24 часов. Через 24 часа среду отсасывали, выбрасывали и заменяли свежей ростовой средой CIT3. Клетки выдерживали в питательной среде в течение 7 дней со сменой среды через день. Через 7 дней, когда клетки становились конфлюэнтными, среду для выращивания CIT3 заменяли на «среду для секреции» (среду для выращивания CIT3 модифицировали удалением EGF и добавлением по 3 мкг/мл овечьего пролактина и гидрокортизона от Sigma). Клетки выдерживали в этой среде еще 7-10 дней, чтобы они стали функциональными (смена среды производилась через день).

Чтобы проверить, действительно ли клетки функционируют, мы просканировали клетки под сканирующим электронным микроскопом. Одним из условий проведения экспериментов по переносу лекарств

является наличие функциональных клеток, образующих цельный монослой. Интегральный монослой отличается от сливающегося монослоя тем, что первый вообще не должен иметь надрыва или внутриклеточного пространства, как оболочка или мембрана. Эта мембрана обеспечивает только трансцеллюлярный транспорт с незначительным парацеллюлярным транспортом лекарств, как это происходит in vivo.

Таким образом, цельный монослой имитирует отличительную черту альвеол молочных желез, заключающуюся в формировании плотных соединений во время установившейся лактации. Отличительной особенностью интегрального монослоя является то, что мембрана показывает очень высокое сопротивление при проверке специальным прибором, называемым «эпителиальным вольтметром». Для наших экспериментов использовались только эксперименты, демонстрирующие трансэпителиальное сопротивление более 800 Ом/см2.

Чтобы получить сравнимые отношения M/P, мы были заинтересованы в разработке системы, которая была бы максимально приближена к системе in vivo. Клетки CIT3, используемые в нашей модели, могут имитировать альвеолы ​​молочных желез как по функции (секреторные), так и по поведению (свойство плотного соединения). Мы решили дополнительно заменить секреторную среду в верхней камере трансвелла контрольным молоком (грудное молоко здоровой матери, 1,5 мл), а одну в нижней — контрольной плазмой (2,5 мл), обогащенной исследуемым препаратом, для получения сопоставимых показателей in vivo. система. Это считалось чтением «нулевого часа». Количество лекарственного средства, используемого для введения в контрольную плазму, зависело от средней концентрации лекарственного средства в плазме при tmax после приема этого лекарственного средства матерью (т.е. значение tmax, полученное в исследованиях in vivo у кормящих матерей).

В нулевой час 1,0 мл образцов плазмы и молока собирали в двух экземплярах, кластерные планшеты, каждый из которых содержал шесть ячеек, затем помещали на качающуюся платформу (Cole Parmer) со скоростью 20 об/мин в CO2-инкубаторе (5% CO2). и 37°С). После этого через определенные промежутки времени собирали образцы плазмы и молока. В отличие от исследования in vivo, в котором был собран только один образец плазмы и молока при известном tmax лекарственного средства в плазме, мы решили собрать образцы до, во время и после tmax. Для оценки целостности монослоя повторно проверяли трансэпителиальную резистентность, тщательно удаляя образцы молока и плазмы и заменяя их средой. В конце эксперимента наблюдали трансэпителиальную резистентность для гарантии целостности мембраны. Собранные образцы затем анализировали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с обращенной фазой (ОФ-ВЭЖХ), разработанным для каждого лекарственного средства. После оценки концентрации лекарственного средства в плазме и молоке рассчитывали их соответствующие соотношения M/P и вносили в таблицу в виде «временной» модели. Анализ образцов исследуемых препаратов Извлечение и анализ образцов

Для выделения исследуемых препаратов использовали 1 мл образца плазмы и молока. Растворителем для экстракции плазмы служили 1 мл ацетонитрила (для рифампицина), 20% хлорной кислоты (для теофиллина и парацетамола) и 6% трихлоруксусной кислоты (для аспирина) соответственно. Растворитель для экстракции исследуемого препарата для молока был аналогичен растворителю для плазмы, за исключением аспирина, где использовали смесь 1 мл соляной кислоты и 6 мл смеси циклогексан:дихлорметан, 2:1. Использовались внутренние стандарты: безилат амлодипина (25 мкг/мл для плазмы, 5 мкг/мл для молока), этофилин (10 мкг/мл для плазмы, 7 мкг/мл для молока), теофиллин (4 мкг/мл для плазмы и молока). ), и салициловая

кислота (40 мкг/мл для плазмы и 10 мкг/мл для молока) для рифампицина, теофиллина, парацетамола и аспирина соответственно. Сопутствующие препараты изониазид и сальбутамол, принимаемые вместе с «исследуемым» препаратом рифампицином и теофиллином, соответственно, не мешали оценке, поскольку они не экстрагировались в используемых растворителях. Экстракты плазмы и молока затем фильтровали через фильтр с размером пор 0,2 мкм и вводили в систему ВЭЖХ.

Подвижная фаза, состоящая из 66 мМ дигидрофосфата калия:ацетонитрила:метанола (40:2:58 по объему), pH которого доведен до 6,0 разбавленной ортофосфорной кислотой для рифампицина, 50 мМ дигидрофосфата калия:ацетонитрил:метанол (90:3:7 по объему) с рН, доведенным до 4,7 с помощью ортофосфорной кислоты для теофиллина, 50 мМ дигидрофосфата калия:ацетонитрил:метанол (95:2:5 по объему) с рН, доведенным до 6 с помощью триэтиламина для парацетамола и 35 % метанола, рН 2,5, доведенного ортофосфорной кислотой до аспирина соответственно. Скорость потока доводили до 1 мл/мин, а X составлял 340

‘ ‘ max

нм для рифампицина, 272 нм для теофиллина, парацетамола и аспирина соответственно.

Затем обработанные образцы были проанализированы методом жидкостной ОФ-ВЭЖХ. Анализ проводили на системе ВЭЖХ DI0NEX-500. Используемая колонка представляла собой колонку Hypercil с обращенной фазой BDS-C18 (5×15 см×4,6 мм), соединенную с фриттой перед колонкой.

Результаты

Характеристики анализа

Время удерживания испытуемых препаратов, а также их внутренних стандартов составляло 5 и 7 мин для рифампицина и амлодипина, 8 и 12 мин для теофиллина и этофиллина, 9 и 18 мин для парацетамола и теофиллина , и 14,5 и 12 минут для салициловой кислоты и пара-нитробензойной кислоты Методы ОФ-ВЭЖХ, использованные для анализа препаратов, показали хорошую линейность (R2 = 0,999), точность (извлечение более 95%) и хорошую чувствительность (5 нг/мл). ). Исходные уровни субъектов в группах I и II не показали какого-либо обнаруживаемого количества лекарственного средства, что подтверждает отсутствие остаточного загрязнения во время забора крови.

В таблице 1 показан перенос исследуемых препаратов из материнской плазмы в грудное молоко. Он показывает средние концентрации исследуемых препаратов в плазме и молоке, а также их отношения M/P. Из таблицы видно, что переход каждого препарата в молоко неодинаков. т. е. теофиллин и парацетамол переносятся в гораздо больших количествах по сравнению с рифампицином и салициловой кислотой.

В таблице 2 показан перенос исследуемых препаратов из плазмы в молоко через монослой CIT3 в различные промежутки времени. Подчеркнутые значения M/P указывают временные интервалы, когда образцы плазмы и молока были собраны для нашего исследования in vivo. Переход четырех испытуемых лекарственных средств из кровообращения в грудное молоко, о чем свидетельствуют отношения M/P, полученные in vitro, продемонстрировал тенденцию, сходную с наблюдаемой in vivo при t каждого лекарственного средства.

На рис. 1 показана микрофотография клеток CIT3, культивируемых in vitro, полученная с помощью сканирующего электронного микроскопа. Клетки пролиферировали в ростовых средах и демонстрировали секреторные отложения при культивировании в секреторных средах.

Лекарства попадают в молоко в соответствии с их физико-химическими характеристиками, факторами клеток эпителия молочной железы, различными путями транспорта лекарств и т. д. Целью нашего исследования было создание модели in vitro, которая точно имитировала бы ситуацию in vivo. Образцы были собраны в разные моменты времени около

tmax исследуемого препарата. Это позволило нам понять скорость переноса каждого препарата. Чтобы проверить нашу модель, соотношение M/P, полученное при заявленном tmax исследуемого препарата [Таблица 2], сравнивали с соответствующими отношениями M/P in vivo, фактически полученными в нашем исследовании [Таблица 1].

Рис. 1: Сканирующая электронная микрофотография клеток CIT3 при культивировании в среде для роста и секреторной среде. На верхней панели показана пролиферация клеток в питательной среде. Секреторные отложения отчетливо видны при культивировании клеток в среде секреции CIT3, что видно на нижней панели 9.0003

Таблица 1:

Концентрации исследуемых препаратов в плазме и молоке, полученные при tm

Препарат Среднее значение и диапазон при tmax в плазме и молоке (n = 15)

Плазма, мг/мл Молоко, мг/мл, соотношение M/P

Рифампицин

Среднее 6,88 1,57 0,23

(± S.E.M.) (1,72) (0,41)

Диапазон 2,76-13,1 0,51-3,54

Theophylline

в среднем 4,45 2,71 0,61

(± с.

Диапазон 1,98–8,24 0,99–4,44

Парацетамол

Среднее 11,45 10,01 0,87

(± S.E.M.) (2,81) (2,58)

Диапазон 3,59-18,38 4,57-18,01

Салициловая кислота

Среднее 18,05 0,63 0,03

(± с.е.).

Диапазон 7,16–31,10 0,28–1,50

Обсуждение

Общеизвестно, что риск, связанный с «материнскими лекарствами» для питомца, может быть сведен к минимуму путем воздействия на него наименьшего количества материнских препаратов. В связи с этим, понимая важность соотношений M/P in vivo для лекарств, обычно назначаемых кормящим матерям, и связанные с этим трудности в их получении, многие фармакологи предложили различные математические уравнения и модели in vitro для их прогнозирования. Однако большинство этих математических уравнений и моделей in vitro не смогли предсказать отношения M/P in vivo.

Перенос лекарств из материнской плазмы в грудное молоко in vivo является физиологическим процессом, включающим множество внутренних и внешних факторов, а именно материнские факторы, факторы эпителиальных клеток молочной железы, физико-химические характеристики лекарств и различные пути транспорта лекарств, такие как пассивный , облегченный и активный.

Нашей целью было разработать модель, которая могла бы имитировать физиологическую ситуацию. Разработанный метод успешно имитировал два внутренних фактора эпителиальных клеток молочной железы, а именно. секреторные свойства клеток молочной железы и свойства плотных соединений, а также пассивный путь транспорта лекарств.

Для валидации этой модели требовались отношения M/P исследуемых препаратов in vivo, для чего требовались чувствительные аналитические методы для оценки концентраций препарата в плазме и молоке. Хотя для анализа лекарств доступен ряд аналитических методов, таких как биоанализ, твердофазный иммуноферментный анализ, радиоиммуноанализ, газожидкостная хроматография и т. д., каждый из них имеет свои ограничения. Мы выбрали ВЭЖХ не только из-за ее специфичности и чувствительности, но и потому, что этим методом можно анализировать практически все типы лекарств. Временной интервал между приемом лекарственного препарата матерью и взятием образца был установлен в соответствии с зарегистрированным tmax исследуемого препарата в плазме, что свидетельствует о его максимальной концентрации в плазме.

Туберкулез – это прежде всего респираторная инфекция, широко распространенная в Индии. Рифампицин является амфотерным липидорастворимым противотуберкулезным препаратом первого выбора и также назначается кормящим матерям. Еще одним часто встречающимся респираторным заболеванием является астма, при которой теофиллин, амфотерный водорастворимый бронходилататор, обычно назначают даже кормящим матерям. Таким образом, больные матери постоянно принимают рифампицин и теофиллин. Парацетамол и аспирин являются одними из наиболее часто назначаемых и принимаемых самостоятельно кислых водорастворимых анальгетиков и жаропонижающих средств, которые также принимаются внутрь в период грудного вскармливания.

Таблица 2:

Отношения M/P (±SEM), полученные в различные моменты времени на модели in vitro — 0,16 — 0,26 0,29 0,32

(0,004) (0,008) (0,012) (0,016)

Теофиллин — — — 0,45 — 0,65 — 0,74

(0,004) (0,012) (0,008)

Paracetamol — — 0,605 — 0,012) (0,008)

. 0,76 — 0,88

(0,028) (0,016) (0,020) (0,06)

Салициловая кислота — — 0,15 0,17 0,22 0,25

(0,01) (0,008) (0,008) (0,008)

Как видно из таблицы 1, среднее отношение M/P для рифампицина составляет 0,23, что указывает на очень низкий перенос рифампицина в молоко. В дальнейшем препарат также назначают профилактически (10 мг/кг массы тела) детенышам матерей, находящихся на терапии рифампицином. Поскольку количество препарата, попадающего в молоко, очень мало, эти матери могут безопасно кормить своих детей грудью.1161 Среднее отношение M/P в момент времени t для теофиллина, полученное как in vivo, так и in vitro, составляло 9.0003

0,6 указывает на то, что он переходит в молоко в больших количествах. Общепринято, что из-за токсичности теофиллина его не следует назначать даже детям, страдающим астмой, поэтому важно свести к минимуму воздействие его на грудных детей через грудное молоко. Как правило, таким матерям рекомендуется кормить своих детей грудью перед приемом препарата и выводить препарат из молока при tmax (2 часа).

Что касается аспирина и парацетамола, наши исследования in vivo показали, что парацетамол попадает в молоко в больших количествах по сравнению с аспирином. Соотношения M/P 0,87 и 0,03, соответственно, получены в сочетании с данными, описанными в литературе. 117,181 Однако, несмотря на низкую степень проникновения салициловой кислоты в молоко, салициловая кислота не рекомендуется кормящим матерям, поскольку она может оказывать потенциальное неблагоприятное воздействие на тромбоциты. функция младенца.1171 В случае парацетамола препарат попадает в молоко в больших количествах и подвергается биотрансформации фазы I путем N-окисления и биотрансформации фазы II путем связывания с глюкуроновой кислотой. Младенец способен выводить только часть метаболита парацетамола путем связывания с серной кислотой.1191 Таким образом, возможность накопления парацетамола у грудных детей представляется вполне реальной, особенно при длительном приеме внутрь. Поэтому рекомендуется, чтобы матери, принимающие этот препарат, изгоняли молоко в момент времени tmax (1 час) перед кормлением ребенка.

Время отбора проб in vitro, как видно из таблицы 2, было определено в соответствии с указанным tmax исследуемого препарата. Сбор образцов в разные моменты времени позволил нам понять скорость переноса каждого наркотика. Соотношение M/P жирорастворимых препаратов рифампицина и теофиллина при tmax (2,5 часа и 2 часа соответственно) составляло 0,29.и 0,65. Для оставшихся двух водорастворимых препаратов салициловой кислоты и парацетамола отношения M/P при t составляли 0,22 и 0,65 соответственно. Тенденция переноса

этих препаратов, отраженная через их отношения M/P, показала сходство в модели in vitro для всех исследуемых препаратов, кроме салициловой кислоты. В случае с салициловой кислотой ее переход в грудное молоко происходит в гораздо более низкой концентрации in vivo, что может быть связано с высоким связыванием препарата с белками плазмы (85%).1201 Однако, хотя плазма использовалась в модели in vitro, он не показал такого низкого переноса, как наблюдается in vivo; это может быть связано с тем, что помимо белков, связывающих плазму, некоторые внутренние факторы могут играть роль в переносе in vivo, что необходимо понять. В настоящее время несоответствие соотношений M/P аспирина in vivo и in vitro находится за пределами нашего понимания.

В заключение, передача исследуемых препаратов, что отражено их отношениями M/P с использованием модели in vitro, показала тенденцию, аналогичную наблюдаемой in vivo. Используя математическую формулу Уилсона, отношения M/P, полученные для тех же препаратов, составили 0,63, 1,55, 1,58 и 0,63 для рифампицина, теофиллина, парацетамола и салициловой кислоты соответственно. Таким образом, отношения M/P, полученные с помощью математической модели, значительно отличаются (P <0,05) по сравнению с in vivo. Разработанная нами модель

потенциально намного лучше, чем математическая модель, предсказывающая

отношения M/P in vivo.

Однако потребуется дальнейшая работа, чтобы эта модель клеточной культуры

стала приемлемым инструментом in vitro для простого скрининга лекарств.

Ссылки

1. Berlin CM Jr. Наркотики и химикаты: Воздействие на кормящую мать. Pediatr Clin North Am 1989; 36: 1089-97.

2. Тоддивалла В.С., Патель С.Б., Бетрабет С. С., Кулкарни Р.Д., Комбо И., Саксена Б.Н. Может ли хроническая медикаментозная терапия матери изменить паттерн ферментов, метаболизирующих лекарственные препараты в печени грудных детей? Дж Клин Фармакол 1995;35:1025-9.

3. Косимичи Х., Ито К., Хисака А., Хонма М., Судзуки Х. Анализ и прогнозирование переноса лекарств в грудное молоко с учетом секреции и обратного захвата через эпителий молочной железы. Drug Metab Dispos 2011;39:2370-80.

4. Wilson JT, Brown RD, Cherek DR, Dailey JW, Hilman B, Jobe PC, et al. Экскреция препарата в грудное молоко человека: принципы, фармакокинетика и прогнозируемые последствия. Clin Pharmacokinet 1980; 5:1-66.

5. Флейшакар Дж. К., Десаи Н., Макнамара П. Дж. Факторы, влияющие на соотношение концентрации лекарственного средства в молоке и плазме у кормящих женщин: физическое взаимодействие с белком и жиром. Дж Фарм Наука 1987;76:189-93.

6. Аткинсон Х.К., Бегг Э.Дж. Прогнозирование распределения лекарственного средства в материнском молоке по физико-химическим характеристикам. Clin Pharmacokinet 1990;18:151-67.

7. Бегг Э.Дж., Аткинсон Х.К., Даффулл С.Б. Проспективная оценка модели для прогнозирования молока: концентрации лекарств в плазме по физико-химическим характеристикам. Br J Clin Pharmacol 1992;33:501-5.

8. Нотарианни Л.Дж., Белк Д., Эйрд С.А., Беннет П.Н. Метод in-vitro для быстрого определения проникновения лекарств в грудное молоко. Бр Дж Клин Фармакол 1995;40:333-7.

9. Уилсон Дж.Т., Браун Р.Д., Хинсон Дж.Л., Дейли Дж.В. Фармакокинетические ловушки при оценке соотношения грудное молоко/плазма для лекарств. Annu Rev Pharmacol Toxicol 1985; 25:667-89.

10. Лау Р.Дж., Эмери М.Г., Галинский Р.Е. Неожиданное накопление ацикловира в грудном молоке с оценкой воздействия на младенцев. Obstet Gynecol 1987;69(3 Pt 2):468-71.

11. Oo CY, Kuhn RJ, Desai N, McNamara PJ. Активный транспорт циметидина в грудное молоко. Clin Pharmacol Ther 1995; 58:548-55.

12. Герк П.М., Москва Дж.А., Макнамара П.Дж. Базолатеральное активное поглощение нитрофурантоина в модели лактации на культуре клеток CIT3. Drug Metab Dispos 2003;31:691-3.

13. Манделл Г.Л., Петри В.А. мл. Противомикробные препараты: препараты, используемые при химиотерапии туберкулеза и лепры. В: Хардман Дж. Г., Молинов П. Б., Гудман Л. С., Гилман А., редакторы. Гудмана и Гилмана «Фармакологические основы терапии». 9-е изд. Нью-Йорк: компании McGraw Hill; 1996. с. 1159-61.

14. Серафин В.Е. Препараты, используемые при лечении астмы. В: Хардман Дж. Г., Молинов П. Б., Гудман Л. С., Гилман А., редакторы. Гудман и Гилман, Фармакологические основы терапии, 9изд. Нью-Йорк: компании McGraw Hill; 1996. с. 659-82.

15. Инсел П.А. Анальгетики-антипиретики и противовоспалительные средства и препараты. В: Хардман Дж. Г., Молинов П. Б., Гудман Л. С., Гилман А., редакторы. Goodman and Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapys», 9-е изд. Нью-Йорк: McGraw Hill Companies; 1996. стр. 625-33.

16. Tran JH, Montakantikul P. Безопасность противотуберкулезных препаратов при грудном вскармливании. ;14:337-40.

17. Ансуорт Дж., д’Ассис-Фонсека А., Бесвик Д.Т., Блейк Д.Р. Уровни салицилатов в сыворотке крови у младенцев, находящихся на грудном вскармливании.Энн Реум Дис 1987;46:638-9.

18. Notarianni LJ, Oldham HG, Bennett PN. Проникновение парацетамола в грудное молоко и его последующий метаболизм у новорожденных. Br J Clin Pharmacol 1987; 24:63-7.

19. Леви Г., Ханна Н.Н., Сода Д.М., Цузуки 0, Стем Л. Фармакокинетика ацетаминофена у новорожденных: образование глюкуронида и сульфата ацетаминофена в зависимости от концентрации билирубина в плазме и экскреции D-глюкаровой кислоты. Педиатрия 1975;55:818-25.

20. Ли С., Джонсон Д., Кляйн Дж., Эпплер Дж. Связывание ацетилсалициловой кислоты и салициловой кислоты с белками в свиной и человеческой сыворотке. Вет Хум Токсикол 1995;37:224-5.

Цитируйте эту статью как: Атхавале М.А., Майтра А., Патель С., Бхейт В.Р., Тоддивалла В.С. Разработка модели клеточной культуры in vitro для изучения соотношения терапевтических препаратов в молоке и плазме.